マウス・ラットの成体脳のルクソールファストブルー染色を行っています。
ところが、染色の際にムラが出来てしまい、とても困っています。何度か条件を変えながら試しているのですが、必ずきれいに染色できる条件を見つけることが出来ていません。
改善ポイントをご存じの方は教えていただけますでしょうか。
・切片:4%PFA固定後に凍結、浮遊切片を貼り付けて染色
・染色条件
1:PBS
2:95%エタノール、5分
3:0.1%LFB染色液一晩、50℃
4:95%エタノール、1分
5:水洗
以降、炭酸リチウムによる分別
よろしくお願いいたします。 |
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