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細胞培養用のDMSOで作った試薬 トピック削除
No.12873-TOPIC - 2025/03/13 (木) 03:25:17 - タミ子2
細胞培養用の試薬を研究室で必要分だけ測ってクリーンベンチ内に持っていき、DMSOで溶かしてそれをstock溶液とした場合、このstock溶液をフィルター滅菌する必要はあるのでしょうか?
 
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No.12873-9 - 2025/03/14 (金) 00:49:35 - タミ子2
ありがとうございました。

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No.12873-8 - 2025/03/13 (木) 16:09:18 - おお
培養の際に培地に抗生物質が入っているのが標準でしょうから、その場合においてはバクテリアの直接影響がない程度の混入は問題にならないだろうとも言えるかもしれません。

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No.12873-7 - 2025/03/13 (木) 15:02:35 - TS
わたしもしません。コンタミが起きた(気づいた)こともないです。

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No.12873-6 - 2025/03/13 (木) 14:37:57 - う
どうしても気になるなら、培地に添加してから培地ごとフィルターろ過すれば良いと思いますけど、私ならしなくてもきにならないです。

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No.12873-5 - 2025/03/13 (木) 13:24:59 - Re
今までにDMSOに薬とかして滅菌なしで培地に添加したことありますが、2〜3日の培養ならば、少なくとも顕微鏡による目視観察ではカビ(37℃だと生育が遅いのでより長く置いておいたらどうなるかわかりませんが)や微生物感染が見られたことないです。それ以上の期間の培養したことないのでわかりません。高濃度のDMSO自体に生物毒性あるし、一旦100%DMSOに曝されて生存できる微生物はあまり多くないような気もします。

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No.12873-4 - 2025/03/13 (木) 12:39:49 - あの
そのStock溶液は実験の際にはさらに希釈するのですよね?

いずれにせよ、当方ではフィルター濾過は、培養系に添加する直前のものだけにしています。そのためDMSO液ではなく、さらに培養液で希釈してものです。

それからその試薬を添加してから何時間や何日、培養するかによって、濾過滅菌が必要かどうか変えています。たとえば添加して数時間しか培養しなくて、その試薬があまり汚れてい無さそうなら、濾過滅菌は省略します。

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No.12873-3 - 2025/03/13 (木) 05:29:43 - おお
https://www.restek.com/articles/syringe-filters-solvent-compatibility-chart?srsltid=AfmBOor-_Uld_wXMyzSXHWrwosYLTmxX2Lv1IebDSgBh1eEZAjAGc72I

フィルターの際には適切な素材のものをおつかいください。水系だとPESとかよく使われると思いますが、DMSO耐性ではありませんので。

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No.12873-2 - 2025/03/13 (木) 05:17:27 - おお
個人的にはしていません。

ただし実験やとかす薬剤によっては(微生物からの抽出、粗精製物とか?)やったほうがいいこともあると思います。フィルター滅菌済みのDMSOも売っているぐらいなので。

https://cdnsciencepub.com/doi/pdf/10.1139/m88-114

細胞培養用のDMSOで作った試薬 削除/引用
No.12873-1 - 2025/03/13 (木) 03:25:17 - タミ子2
細胞培養用の試薬を研究室で必要分だけ測ってクリーンベンチ内に持っていき、DMSOで溶かしてそれをstock溶液とした場合、このstock溶液をフィルター滅菌する必要はあるのでしょうか?

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