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(無題) 削除/引用 No.12823-5 - 2025/02/09 (日) 19:24:50 - ゴン 皆様 コメントありがとうございます。 あまり頻繁に換えない方も、毎回換える方もいて、絶対にこうしないとうまくいかない、という感じではなさそうですね。 あのさんのやり方は、抗体を節約する方法として取り入れていますが、 洗浄にも使っている方を初めて知りました！ 一度試してみます。

(無題) 削除/引用 No.12823-4 - 2025/02/07 (金) 08:07:04 - TS 比較したことはないですが、わたしは毎回替えますね。スライドが少ない時は、小さなドーゼやビーカーとかでやるときもあります。PBSは粉からストック（20Xとか）を作れば、消費はかなり気にならなくなるのではと思います。 他の方法と比べたことはないので、違いはわかりません。

(無題) 削除/引用 No.12823-3 - 2025/02/06 (木) 20:20:46 - あの 当方では、染色ビンを使いません。次のように簡単にしています: 　抗体反応後のスライドガラスをバッファでリンスして抗体を除去 　スライドガラスを水平に置いて、その上に洗浄バッファをピペットで置いて数分まつ 　 　洗浄バッファを捨てて、スライドガラスを水平に置き、バッファを置いて捨てる 　この洗いを数回繰り返す これで大抵　大丈夫なので、さらに省力化するために、流しの上に簡易な台を置いて、すぐにデカントできるようにしています。 免疫染色の他に、色素による染色とかもこの楽チン方法でやってます。

(無題) 削除/引用 No.12823-2 - 2025/02/06 (木) 12:15:59 - dmem 組織染色はWBと比べて、元々あまり抗体が残存しない印象があり、あくまで経験的な主観ですが洗浄回数や時間を変えても結果はあまり違いは見られないように感じています。(バックが変に高いような時は多くの場合元々抗体自体があまり良い状態でないことが多く、洗浄では解決しないことが多い気がします。)私はPBS(オプションで0.05%Tween含む場合あり）を染色びんに満たしてパラフィルムで封をしてゆっくり転倒混和を10回くらいして、これをPBSを替えて3回やってます。あまり激しく振ると切片が剥がれることがあるのでその辺りは常識的な範囲で。洗い方は研究室内でも人により様々で、長い時間シェーカーで振ってる人もいます。 あとNegatie control (抗体の代わりにisotype Igを等濃度で使用）では何も染まらないことは毎回確認してます。Tweenはあってもなくてもあまり関係ないようですが、もしバックが高いようならば入れてください。

組織切片染色で使用する洗浄用PBSの交換頻度 削除/引用 No.12823-1 - 2025/02/06 (木) 09:34:32 - ゴン 組織切片染色の初心者です。 スライドガラスに貼り付けた組織切片を染色するときに、 染色ビンにPBSを入れて洗浄×３回のような手順があると思いますが、 みなさんはどれくらいの頻度でPBSを新しくしていますか？ 毎回換えているとすごい量のPBSが必要になるので、 これくらいまでは大丈夫といった経験談を教えていただきたいです。 あと、ＷＢのメンブレンは蒸留水で洗うプロトコルにかえてうまくいっています。 組織染色でも試している人がいたら感想を教えていただきたいです。

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