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(無題) 削除/引用 No.12748-4 - 2024/12/22 (日) 22:39:28 - TTT 遠心機で32℃にすることについては、バケットが回転すると空気摩擦ですぐに中は温まる。冷却機能は付いていると思うので32℃に設定しとけば温度はその付近で安定する。

(無題) 削除/引用 No.12748-3 - 2024/12/22 (日) 14:54:28 - TTT 12 well plateの真ん中４ wellを使うと縁に細胞が飛ばない。 あと、遠心する理由ですが、昔とある先駆け的なラボのwebに、細胞膜の熱運動のゆらぎでウイルス粒子が結合しにくくなっているのをGをかけて細胞膜のゆらぎを抑えて結合を安定させるため、とあったのを記憶しています。ちなみに、3,000 rpm程度の遠心ではウイルス粒子は全く沈下しないので、遠心力でウイルス粒子を細胞の上に落とすという解説は耳にしても信じないように。

(無題) 削除/引用 No.12748-2 - 2024/12/22 (日) 09:21:32 - おお 温度については２５度のプロトコールも一般的に広まっているようです。 なんとなく聞いたところからの想像では遠心するのは細胞に物理的刺激をして取り込みを促すためのものらしいので、偏りが気になるなら途中２回ぐらい止めて上下反対にして遠心を再開するとか、駄目でしょうかねぇ。 偏る側に紙数枚挟むとかで調整できればいいでしょうけどどうかな。

浮遊細胞のレンチウイルス感染 削除/引用 No.12748-1 - 2024/12/21 (土) 21:02:43 - ATC 浮遊細胞のレンチウイルス感染を行っています。 通常のプロトコールを見ると、6 wellのdish等に、培養細胞とウイルスを入れて、32度で遠心を1，2時間ほど行うのですが、6 wellのdishを通常の遠心機で遠心すると、細胞が底に異動するかと思いきや、遠心の逆方向のヘリに偏ります。偏るとウイルスの粒子は、底にたまった細胞の表面にしか感染しないのではと愚考するのですが、みなさん、どう対処されているのでしょうか。 また、32度にまで上げられる、dish用の遠心機がないのですが、どうやって対処したらいいのでしょうか。

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