Bio Technical フォーラム

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siRNA トピック削除
No.12696-TOPIC - 2024/11/21 (木) 17:43:56 - RNAi
分裂する普通の培養細胞にsiRNAを導入したとき、細胞分裂したらsiRNAも分配されると考えていいですか。細胞あたりの量は半分になるとして。

少なくとも>70% 飽和の細胞にトランスフェクションしましょうと書いてあるのですが、そんなだと2、3日培養したら完全にコンフレントになり困ります。低い飽和度でトランスフェクションすると細胞分裂で希釈されていくのであえて高密度の細胞にトランスフェクションするのでしょうか。
 
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(無題) 削除/引用
No.12696-2 - 2024/11/22 (金) 00:24:34 - おお
私の感覚では細胞密度が低いと導入試薬の毒性が顕著になるような気がしてます。70%コンフだと分裂抑制がかかるような印象もあるけど大抵の細胞株は癌化、あるいは不死化しているので、あまり細胞増殖速度は落ちないと思われます。トランスフェクションして1:2に撒き直して、もう一度トランスフェクションすると言った方法をとることもあるようです。

siRNA 削除/引用
No.12696-1 - 2024/11/21 (木) 17:43:56 - RNAi
分裂する普通の培養細胞にsiRNAを導入したとき、細胞分裂したらsiRNAも分配されると考えていいですか。細胞あたりの量は半分になるとして。

少なくとも>70% 飽和の細胞にトランスフェクションしましょうと書いてあるのですが、そんなだと2、3日培養したら完全にコンフレントになり困ります。低い飽和度でトランスフェクションすると細胞分裂で希釈されていくのであえて高密度の細胞にトランスフェクションするのでしょうか。

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