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(無題) 削除/引用 No.12672-10 - 2024/11/12 (火) 07:21:48 - MM 皆さん、ありがとうございました！

(無題) 削除/引用 No.12672-9 - 2024/11/10 (日) 05:41:59 - あの ネット検索する際に　使うと良いキーワードを念のため上げときます 　半値幅　英語は　half width 　吸収スペクトル　英語は　adsorption spectra あとは基質名前とか、nmとか入れて、ググって、検索結果を画像表示すれば大抵場合　見つかります。

(無題) 削除/引用 No.12672-8 - 2024/11/10 (日) 04:28:04 - あの 比色法の場合でも、10nmぐらいの違いなら無視します。 さらに大きな違いについては、メーカーにといあわせたり、Google検索したりした方が良いです。

(無題) 削除/引用 No.12672-7 - 2024/11/09 (土) 22:00:22 - MM 皆さん、ありがとうございます！ 今回はELISAではなく単純な反応液を加えて発色させる比色法による溶液中の物質測定ですが、ELISAの場合も迷ったことがよくあるので参考になりました。 ちなみに、何nmくらいまでの差が許容範囲と考えますか？ピークが急激に落ちていくので20nm、30nmとずれていけばさすがに・・・というところがありそうです。 ELISAならたいていTMBなのであまり迷うケースに会うことがなさそうですが、比色法だといろいろな波長を見るので、皆さんの感覚を教えていただきたいです。

(無題) 削除/引用 No.12672-6 - 2024/11/09 (土) 20:21:44 - あの 次のページの3番目の図がわかりやすいです 　https://www.atto.co.jp/products/luminescence_absorption/elisa/hrpelisa/wse-7145-ezelisa-tmb

(無題) 削除/引用 No.12672-5 - 2024/11/09 (土) 18:59:24 - あの たぶん基質は、TMBだと思います。反応液は青色ですよね？ そのため、もし心配なら、620nmで測定しておいて、1M程度の塩酸か硫酸を入れて黄色にしてから 大抵のプレートリーダーに乗っている450nmフィルターでも測定すれば良いです。 酸を入れる前のタイミングで、一番高いウェルの値が、そのプレートリーダーの測定限界の半分くらいになったら、620nmで測定して、酸を入れて、450nmで測定すれば良いです。 たとえば、リーダーの測定の上限界が3.5なら、1.2から1.6ぐらいになったタイミングで620nmで測定して、酸を入れて、シェークして、可能なら遠心機でスピンダウンして、450nm で測定すれば良いです。

(無題) 削除/引用 No.12672-4 - 2024/11/09 (土) 17:58:59 - 1 吸収スペクトルの曲線見ればわかるように、そのくらいのズレであれば事実上、正規の波長で測定したときと比べてほとんど結果には影響しないと思いますが、どうしても指定の波長でやりたいということでしたら、 プレートリーダーは汎用性が高いので他の研究室で、より目的に適した機種を保有しているところはあるのではないでしょうか。もし可能であれば学内（所属機関内）に『もし持っていたら貸してもらいないか』と一斉メールしてみるとか。 代理店の方に相談して、メーカーから購入検討のためのデモ機ということで一定の期間貸し出してもらう方法もあると思います。

(無題) 削除/引用 No.12672-3 - 2024/11/09 (土) 17:55:14 - Dohn Joe 吸光度のスペクトルは針のようなピークが現れるのでなく、富士山のような山が現れるので、620 nmで測れば宜しいのでは？

(無題) 削除/引用 No.12672-2 - 2024/11/09 (土) 17:34:36 - あの 10nmぐらいのズレは気にせずに使っています。

プレートリーダーの波長 削除/引用 No.12672-1 - 2024/11/09 (土) 17:00:42 - MM お世話になります。 kitを使って96wellプレートで物質の濃度測定をすることになったのですが、kitのプロトコールでは630nmで測定するように書かれています。ラボのプレートリーダーはフィルタータイプで、ELISAの副波長用の620nmのフィルターしか入っておらず、購入も難しいです。このタイプのプレートリーダーしかない環境で「○○を測定したいんだけど調べておいて」といわれることが多く、kitをみつけてもいつもこの壁にぶち当たります。 ELISAや比色反応の波長って完全一致でないと全く使えないものなのでしょうか。検量線と同程度にずれると考えると大丈夫と思えなくもないのですが、フィルターを購入しないと無理ですと断言してしまえるものなんでしょうか。 よろしくお願いいたします。

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