Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

WBのマーカーが不正確 トピック削除
No.12659-TOPIC - 2024/10/31 (木) 12:40:08 - 通りすがり
過去におそらく同じようなトピックがあったとは思うのですが、、、

 WBでPrestained(青)のマーカーを使っているのですが、一つだけでなく、様々な抗原を染めて見ても、一貫して予想より10 kDA強大きい位置に出ます。言い換えると、マーカーが常に必要以上に速く流れている感じです。

1:分注していないで凍結融解を繰り返しているからか?それにしては、バンドはぼやけずシャープ。

2:マーカーとサンプルが違うバッファーに溶けているからか?ただ、以前にはここまで気になるような差はなかったように思う。

 などなどと思い悩んでいます。原因及び、対策などがあればご教授いただけますでしょうか。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.12659-5 - 2024/10/31 (木) 18:43:00 - qq
他の部屋に頼んで、別のマーカーを一緒に流してみて相互比較するのはいかがでしょうか?
マーカーのせいなのか、それともそれ以外の問題なのか分かるんじゃないでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.12659-4 - 2024/10/31 (木) 17:03:35 - おお
低分子領域のマーカーは、メーカー間でのブレが結構ある。また、今はゲルや泳動のバッファーもバリエーションがあり、マーカーのサイズをどのバッファーシステムで決めたのかと言うのもあると思う。それと違うバッファーでは移動度がかわる可能性。

(無題) 削除/引用
No.12659-3 - 2024/10/31 (木) 13:23:25 - 通りすがり
InvitrogenのBenchMark Pre-stained Protein Ladder、 cat#10748010です。

どのということはなく、全体的に10kDa以上、シフトしている感じです。

(無題) 削除/引用
No.12659-2 - 2024/10/31 (木) 12:50:51 - う
どの製品のどのサイズのバンドですか?

WBのマーカーが不正確 削除/引用
No.12659-1 - 2024/10/31 (木) 12:40:08 - 通りすがり
過去におそらく同じようなトピックがあったとは思うのですが、、、

 WBでPrestained(青)のマーカーを使っているのですが、一つだけでなく、様々な抗原を染めて見ても、一貫して予想より10 kDA強大きい位置に出ます。言い換えると、マーカーが常に必要以上に速く流れている感じです。

1:分注していないで凍結融解を繰り返しているからか?それにしては、バンドはぼやけずシャープ。

2:マーカーとサンプルが違うバッファーに溶けているからか?ただ、以前にはここまで気になるような差はなかったように思う。

 などなどと思い悩んでいます。原因及び、対策などがあればご教授いただけますでしょうか。

5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。