全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.1263-3 - 2012/12/18 (火) 18:25:46 - おお 結局使わなくて捨てるか、使ってうまくいかなかったら捨てるか、ってくらいの違いですよね。GFPとかタグか10%ぐらいGFPとか加えていて顕微鏡で効率を確認できるならそんなに手間ではないですね。個人的にはそんなに不安定なものを使っているかなぁとはおもいますが。DNA複合体がそこにたまってきてくっつきあっておおきくなってるかもしれません。ピペッティングとかボルテックスでふせげるかなぁ。。。 かってな想像が膨らんでなす。。。

(無題) 削除/引用 No.1263-2 - 2012/12/18 (火) 17:26:09 - み かなり細胞に対する毒性が高くなることが予想される。 かなり導入効率が低くなることが予想される（全く導入されないまたは検出限界以下になる場合もある）。 これらがあいまって期待される結果が得られるかは不明。 得られたとしてもその結果が信憑性あるものか怪しい。 結局、まともな手法によるリピートが必要。 しかし手元には1回の実験分のプラスミドしか無いとのこと。 そもそも再現性をとるつもりは無かったのか？ もう1回プラスミドを調製しなおしてリピートするまで待てないのなら予備的にやってみたら良いだけじゃないですか？ 勿論、まともな予備データが得られるかは誰にも保証できないが。

Fugeneのplasmidとのincubationを24h 削除/引用 No.1263-1 - 2012/12/18 (火) 15:55:55 - Descartes HEKにFugeneでtransfectionしようとしています。 mediumにFugenを加え、プラスミドを加えて1h incubateした後に、細胞にdropする予定が、incubateionしているのを忘れてしまい、24h経ってしまいました。これを細胞にdropしても、無駄でしょうか？ プラスミドが1回分しか手元にないのと、Fugeneが高価であるため、可能なら続行したいのですが、transfectionの効率はかなり下がってしまうでしょうか?

全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---