全13件 ( 1 〜 13 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.12593-13 - 2024/09/29 (日) 17:25:48 - おお >[Re:11] Protein Gさんは書きました : > トピ主です。 > 皆さま、たくさんのご回答ありがとうございました。 > 香川のプロテノバ知りませんでしたが、mouseのIgGの全てと反応できるのは魅力的です。 > > 私は細胞のライセートからのIPをすることが目的です。 > おおさまからもご指摘ありましたが、香川の会社は抗体精製は出来てもIPができるかは書かれていませんね。 > 楽観的に見て作り方は基本的に一緒でしょうから大丈夫そうではあるのですが、ある時IgG 精製と謳い文句のものを使ってみたのですが、あれ？って感じな事があったので。サイドバイサイドの実験や検証をしてないのでビーズのせいだと言えませんがどうなのかなぁと思った次第です。IPの場合、単なる抗体精製より厳しい条件になる事が多いので、精製用としている物はIPでの検証をしてないかもと思うとちょっと不安です。

(無題) 削除/引用 No.12593-12 - 2024/09/29 (日) 10:12:33 - おお https://www.e-nacalai.jp/ec2/EC-srchdetl.cfm?jump=EC-srchdetl&syohin=0118644&syubetsu=1 \17,000 定価ですが

(無題) 削除/引用 No.12593-11 - 2024/09/29 (日) 08:48:20 - Protein G トピ主です。 皆さま、たくさんのご回答ありがとうございました。 香川のプロテノバ知りませんでしたが、mouseのIgGの全てと反応できるのは魅力的です。 私は細胞のライセートからのIPをすることが目的です。 おおさまからもご指摘ありましたが、香川の会社は抗体精製は出来てもIPができるかは書かれていませんね。 私が前のラボではハイブリドーマ培養上清1 Lから、MEP hypercelを用いて精製したことがあります。 この原理は疎水性相互作用であるため、ライセートからのIPはできませんでした。 StbtのProtein A.Gはアメリカにいた際に使っていましたが、日本だといくらになるのでしょうか。 他にProtein Gでおすすめがありましたらご教示いただけると幸いです。

(無題) 削除/引用 No.12593-10 - 2024/09/27 (金) 19:18:39 - 1 最近の製品は品質管理がしっかりしてるのでたぶん大丈夫と思うけど、最後の溶出時にSDS　bufferとか　酸性bufferとかを使用する際にprotein Gがビーズから外れて（たぶんちゃんと共有結合してないのが少し混じってるのだと思う）溶出液に混入して、(proteinGとかは結構丈夫で、一旦SDSで変性しても、まだIgGと反応するので)、わずかに混入したprotein GとかがIP-WBとかをしたときに１次、２次抗体と反応して、よくわからないけどなんか本物っぽいシグナルが出て、（並行してnormal IgGでもIPしていれば容易に識別できるけど、していないと）、うっかり本物のシグナルと誤認して研究がとんでもない方向に迷走してしまうリスクがあるので、IPに使う場合はcontrolとしてのnormal IgGでのIPも忘れずやってください。

(無題) 削除/引用 No.12593-9 - 2024/09/27 (金) 03:50:27 - あの もっとも次のような話もあるので、免疫沈降に使える、使えないは、目的次第ということになりそう https://www.veritastk.co.jp/sciencelibrary/learning/dynabeads-ip-learning.html

(無題) 削除/引用 No.12593-8 - 2024/09/27 (金) 03:44:12 - あの そういえば、トピ主さんの目的は何かわかりませんね。 ちなみに次のような商品もあるので、抗体精製用でも、免疫沈降に使える可能性が多いにありそう: https://www.funakoshi.co.jp/contents/3591 各種抗体の精製に使用できるビーズです。精製プロトコルが添付されており、簡便な操作で迅速にイムノグロブリンの精製や免疫沈降が行えます。

(無題) 削除/引用 No.12593-7 - 2024/09/27 (金) 02:19:20 - おお 素朴な疑問ですが、抗体精製用を謳い文句にしているビーズはIPに使って遜色がないものでしょうか。 別にスレ立てるか。

(無題) 削除/引用 No.12593-6 - 2024/09/26 (木) 21:32:36 - あの 徳島ではなく香川でした

(無題) 削除/引用 No.12593-5 - 2024/09/26 (木) 21:30:58 - あの 予算が少なかったときに、次の徳島の会社から購入した商品はすごくコスパが良かったです。 https://protenova.com/publics/index/29/ 以後、海外製品なんて買う気は失せました。

(無題) 削除/引用 No.12593-4 - 2024/09/26 (木) 15:53:26 - おお cytivaも比較的安かったかも。違ったらごめん。

(無題) 削除/引用 No.12593-3 - 2024/09/26 (木) 15:51:53 - おお https://www.scbt.com/p/protein-a-g-plus-agarose?srsltid=AfmBOoqevpnDggktHFTy6oejPxW1OYvMIZjDXQH8B5BjvdozR8X8Ljhs Protein A/G PLUS-Agarose sc-2003 2 ml $62.00

(無題) 削除/引用 No.12593-2 - 2024/09/26 (木) 14:37:28 - 1 protein AもしくはGーmagnetic beadsについては無料sample品とかで提供してくれるところ時々見かけます。何社かのものを使ってきましたが結合容量がメーカーにより少し幅があるものの、基本的にどこでも結果には大差ない感じ（=ハズレはない）がしています。

Protein Gビーズで安価なおすすめなもの 削除/引用 No.12593-1 - 2024/09/26 (木) 12:59:04 - Protein G Protein Gビーズで安価なおすすめなもの教えていただけませんでしょうか？ よろしくお願いします。

全13件 ( 1 〜 13 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---