BioTechnicalフォーラム [精製タンパク質の凍結乾燥]

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No.12575-7 - 2024/09/17 (火) 14:42:14 - おお

>[Re:4] qqさんは書きました :
> 凍結乾燥未経験とのことなので、、
> 精製したタンパク質を予め低塩濃度の緩衝液に置き換えておく必要があります。
> 可能であれば、炭酸アンモニウムやギ酸アンモニウムの緩衝液（など揮発性の緩衝液）に透析やゲルろ過できれば良いです。

基本そうですが、抗体とかPBS中で凍結乾燥されたものが商品として出回ってたりします。揮発性のバッファーを使うのは、pHの偏りなどを起こさない様にするという考慮のため、とかした時のバッファー成分の持ち込みを避けるためでもあります。TRIS HClを使うと乾燥時にHClが抜けるのでアルカリにどんどん偏っていきます。

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No.12575-6 - 2024/09/17 (火) 14:33:58 - おお

業務用ではなく研究用の機器が販売されています。一度代理店に聞いてみるといいでしょう。

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No.12575-5 - 2024/09/17 (火) 14:21:13 - おお

>[Re:3] ズコットさんは書きました :
> ラボででしょ。
> 業務として定常的に作業するのでも無いのに、専用の装置なんて用意しませんよね。
> 油拡散ポンプにトラップを付けて直接サンプルにつなぐかデシケーター(要：熱供給)にでも入れて引くかすれば良い。
> 実験なら経験者に指導を受けるのはどちらかにしろ必須です。
>
凍結乾燥ではない様な気がするが。

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No.12575-4 - 2024/09/17 (火) 12:06:51 - qq

凍結乾燥未経験とのことなので、、
精製したタンパク質を予め低塩濃度の緩衝液に置き換えておく必要があります。
可能であれば、炭酸アンモニウムやギ酸アンモニウムの緩衝液（など揮発性の緩衝液）に透析やゲルろ過できれば良いです。
界面活性剤はどうしても必要であれば、できるだけ低濃度に抑える必要があるでしょう。

１さんも指摘されています？が、遠心乾燥機（スピードバックなど）の転用は凍結試料が乾燥中に溶けてしまうでしょうから好ましくないと思います。

(無題)

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No.12575-3 - 2024/09/17 (火) 11:50:43 - ズコット

ラボででしょ。
業務として定常的に作業するのでも無いのに、専用の装置なんて用意しませんよね。
油拡散ポンプにトラップを付けて直接サンプルにつなぐかデシケーター(要：熱供給)にでも入れて引くかすれば良い。
実験なら経験者に指導を受けるのはどちらかにしろ必須です。

(無題)

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No.12575-2 - 2024/09/17 (火) 11:10:34 - 1

凍結乾燥機という低速遠心機と減圧状態を作る吸引ポンプと凍結機器が一体になったような専用の機器が必要です。所属機関の共通機器にあるかもしれませんので担当者に聞いてみてください。薬学部や農学部、理学部の化学系などが身近であれば、よく使うものなので聞いてみてあれば使わせてもらえるかどうか聞いてみてもいいかもしれません。初めて使う人は一人でなく必ず慣れている人と一緒にやってください。どこにもない場合は、あるいは、私たちは、メーカーもしくは代理店に相談して、将来の購入の検討のためのデモ機として数日貸し出してもらうこともあります。

似たようなもので有機溶媒などを除去するための単に遠心しながら吸引する機器のもあるのですが、それとは全然違うものなので気をつけてください。

精製タンパク質の凍結乾燥

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No.12575-1 - 2024/09/17 (火) 08:34:16 - たこ

精製したタンパク質を凍結乾燥したいのですが、これまでラボでやったことがありません。
どのような機種で、どのようにすれば、よいのでしょうか？
ご存じの方教えてください。

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