Bio Technical フォーラム

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Colorimetric assay 分光法について  トピック削除
No.12549-TOPIC - 2024/08/30 (金) 13:48:25 - 研究助手候補生
abcamのkit(ab241029)でgamma GTを分光法で測定しようとしています。kitはシンプルでsampleとGGT substrateを混ぜて37度でincubateし、時間差でODを測定するというものです。ポジティブコントロールはうまくいきましたが、サンプルのマウス血清15種類がincubate時間を2時間まで伸ばしても全く反応しません。ガイドには血清10μl使用と書いてありましたが、他に0.5,1,2,5μlも試しましたが結果変わらずでした。サンプルの保存は血液を円心分離し、血清にしてから-80度で保存していました。マウスの血清が使用できるかはガイドには記載されてませんが、kitを使用した論文の中にはマウスの血清をしようしたものもありました。非常にサンプルなkit故にどこを修正すれば良いのか案が浮かびません。どなたかお知恵をお借りしたいです。
 
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(無題) 削除/引用
No.12549-4 - 2024/08/31 (土) 01:44:30 - 研究助手候補生
ありがとうございます。abcumには問い合わせていますが、未だ明確な返事がない状況です。
メーカーに動物種など問い合わせてみます。
血清はserumという意味で使用しております。誠にありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.12549-3 - 2024/08/31 (土) 01:22:13 - あの
そのキットを使ったことはありませんが、メーカーに次のことを確認した方が良いです:

測定系そのものについての質問
 対象動物種
 最低検出感度など

サンプル中の酵素活性の残存に関わる質問
 サンプルの採取方法と保存方法
 血清の保存可能期間など

それから念のため、
 血漿の意味で血清と誤記していないか。

(無題) 削除/引用
No.12549-2 - 2024/08/31 (土) 00:36:09 - おお
肝機能障害などなければ非常に低いと思われますが。Abcamには問い合わせてみましたか?

Colorimetric assay 分光法について  削除/引用
No.12549-1 - 2024/08/30 (金) 13:48:25 - 研究助手候補生
abcamのkit(ab241029)でgamma GTを分光法で測定しようとしています。kitはシンプルでsampleとGGT substrateを混ぜて37度でincubateし、時間差でODを測定するというものです。ポジティブコントロールはうまくいきましたが、サンプルのマウス血清15種類がincubate時間を2時間まで伸ばしても全く反応しません。ガイドには血清10μl使用と書いてありましたが、他に0.5,1,2,5μlも試しましたが結果変わらずでした。サンプルの保存は血液を円心分離し、血清にしてから-80度で保存していました。マウスの血清が使用できるかはガイドには記載されてませんが、kitを使用した論文の中にはマウスの血清をしようしたものもありました。非常にサンプルなkit故にどこを修正すれば良いのか案が浮かびません。どなたかお知恵をお借りしたいです。

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