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(無題) 削除/引用 No.12545-8 - 2024/08/30 (金) 04:42:32 - あの おっと、 1だけ使っている方々、ブロッキング材は何を使っていますか？ 当方では、can get signal を使う場合、ブロッキング材も専用のを使っています。ハイブリバッグ使っいるので、1や2よりも、使用量が少なくて済むこともあるので。あのブロッキング材はかなり優秀と感じています。見た目は、非動物性のものですが。 なお、bアクチンには、can get signalを一切使わずに、ブロッキングもスキムミルクを使っています。

(無題) 削除/引用 No.12545-7 - 2024/08/30 (金) 00:53:59 - WB 皆様、レスをありがとうございます。 片方（Solution1）だけで実験されてる方が実際におられるとのこと、大変参考になりました。二次抗体は通常十分に優秀だからSolution2より1を優先（どころか、Solution2も使うとバックが上がる場合すらある）という話も納得です。まず、Solution1だけを買ってみて試してみます。ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.12545-6 - 2024/08/30 (金) 00:27:42 - おお ポジティブな評価が多いですね。ということは結構感度が稼げてるのですね。ちょっと導入を考えたくなってきました。それかいまPVPでやってるのでちょっとPEG加えてみるかな。

(無題) 削除/引用 No.12545-5 - 2024/08/29 (木) 08:21:11 - TS わたしもSolution1だけでやっている実験があります。 ケースバイケースですけど、どっちかというと促進したいのは（性能がいまいちな？）一次抗体の反応なので（二次抗体は通常、十分に優秀）、そのようなケースだとSolution１だけでも十分に効果があります。そういう意味で２だけっていうのはあまり効果的ではないような気がします。

(無題) 削除/引用 No.12545-4 - 2024/08/29 (木) 06:28:06 - あの 片方だけを使った経験はありませんが、もし買うなら、1だけ買うのが良いでしょうね。理由は次です: 　1は第一抗体用 　2は第二抗体用 　市販の第二抗体は非常に優れたものが多いし、安い 　1を使うと、高価な第一抗体のコストを節約できる

(無題) 削除/引用 No.12545-3 - 2024/08/29 (木) 04:24:25 - たこ いくつかのターゲットに対して、Solution 1だけで使っていましたが、シグナルは断然強くなりました。 ケチってsolution 1をTBSTで数倍(2-5倍くらいの範囲)に希釈しても結構効果があると言っていた後輩もいました。 私はSolution 2併用だとバックが上がることが多かったのであまり使いませんでした。 もちろんwashが足りない、２次抗体の希釈が足りないなど最適化が適切になされていなかったからというだけかもしれません。 参考になれば幸いです。

(無題) 削除/引用 No.12545-2 - 2024/08/29 (木) 03:34:17 - おお どなたかここでそれに関する公開特許のリンクとかつけてくれてましたが、含まれているものはPVPとPEGだったと思います。加えて若干塩濃度が高かったかなと。 シグナルが強くなるというのはどうなんでしょうかね。感覚的には多分ノイズが減って感度が上がるっていう感じだと思いますが、、、それとも抗体抗原反応を強める環境になってるんでしょうか。PEGあたりならそういうのもあるかもですが。 http://www.kenkyuu2.net/cgi-biotech2012/biotechforum.cgi?mode=view;start=3;Code=9251 このあたりのトピも感度で言えば参考になるかもです。

can get signalについて。Solution1（又は2）だけでも効果ある？ 削除/引用 No.12545-1 - 2024/08/29 (木) 01:19:39 - WB よろしくお願いします。東洋紡のCan Get Signalについて質問です。 WBでとあるタンパクの量を調べています。分泌されるタンパクで、培養液(DMEM)をserum freeのものに変えてから24時間後に回収して、Amiconで濃縮したものをサンプルとしています。 現在使っている一次抗体、二次抗体で目的のバンドは検出できていますが、シグナルが少し弱いのが悩みです。ECLを高感度のもの（ThermoのSuperSignal West Femtoを使っています)にして、長いExposureでバンドを見ている状態です。 そこで、シグナルの増強の為に、この掲示板で評判の良いCan Get Signalを使おうかと考えています。私は今アメリカにいるのですが、Fisher Scientificで取り扱ってました。今いる研究機関はFisher Scientificのものは安く買えます。 ところが、Solution1とSolution2（それぞれ一次抗体と二次抗体に使用）のセットのもの（Cat.# NKB101かNKB101Tは取扱ってなく、別売り（NKB201とNKB301)のものだけが購入可能のようです。 研究費の問題で、安くあげられるなら安くあげたい状況にいます。そこで、Solution1だけ、あるいはSolution2だけ、で使っても効果が得られるものかどうか、経験のある方がおられたらお話を聞いてみたくてトピックを上げました。 Can Get SignalのSolution1だけ（または2だけ）でシグナル増強効果が見られた、あるいは片方だけでは効果が無かったが両方使ったら効果が見られた、などの経験談ありましたら宜しくお願い致します。 （勿論、私が使っている抗体では別の話かもしれない、ということは承知しています。その上で、経験者の方がおられたらよろしくお願いします）

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