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異なる形質転換大腸菌を一枚に播種する方法(プレート有効活用) トピック削除
No.12533-TOPIC - 2024/08/22 (木) 16:04:45 - KZM
いつも勉強させていただいています。
今日13個の異なる形質転換大腸菌Stbl3を、LB/Ampプレートに播種するのですが、プレートの節約のため、1プレートあたり2個のサンプルを播種出来たらしたいです。

どういった方法がおすすめでしょうか?
教えてもらえると有り難いです。
よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.12533-5 - 2024/08/22 (木) 20:36:45 - apes
寒天培地の裏にマジックで線を引いて4あるいは6分割、それぞれの区画に滅菌つまようじで、菌株をストリーク。

8分割はコンタミしたことがあるからやらない。

(無題) 削除/引用
No.12533-4 - 2024/08/22 (木) 17:55:07 - G25
1) 主にcfuを求めるときに使われるspot plating methodを応用する。
希釈列を作るのが面倒かもしれないけど、正確にcfuを求めるためじゃなく、シングルコロニーが分離できるようにするためなので、大雑把でいい(チューブでvortexを使って混ぜるとかしないでマルチウェルディッシュでもいいし、ピペットチップをいちいち取り替えるとかしないでもいいでしょう)。
https://www.google.com/search?q=bacteria+spot+plating&client=firefox-b-d&sca_esv=8f49df3e5247a172&udm=2&biw=1440&bih=719&sxsrf=ADLYWIJtQqYNI605jQs3b-V6DIarFmrCvg%3A1724316516096&ei=ZPvGZqTLBafy1e8Pz6XdyAw

2) spreadじゃなくstreakする。

(無題) 削除/引用
No.12533-3 - 2024/08/22 (木) 17:20:48 - a
https://stock.adobe.com/jp/images/yeast-cells-saccharomyces-cerevisiae-streaked-on-agar-plate/69373251

(無題) 削除/引用
No.12533-2 - 2024/08/22 (木) 16:50:47 - あの
cDNAなどのライブラリーの維持とかした経験のある人が詳しいけれども、

未使用のプレートの裏側に、マジックで線をマス目に引いて、適宜、目印や番号を書いて、寒天培地を作る。
次に、滅菌爪楊枝でチョンチョンしていく感じでいけると思います。

異なる形質転換大腸菌を一枚に播種する方法(プレート有効活用) 削除/引用
No.12533-1 - 2024/08/22 (木) 16:04:45 - KZM
いつも勉強させていただいています。
今日13個の異なる形質転換大腸菌Stbl3を、LB/Ampプレートに播種するのですが、プレートの節約のため、1プレートあたり2個のサンプルを播種出来たらしたいです。

どういった方法がおすすめでしょうか?
教えてもらえると有り難いです。
よろしくお願いします。

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