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(無題) 削除/引用 No.12495-4 - 2024/08/08 (木) 00:31:29 - おお まあここで答えられる人がいればそれは助けになるかもですが、文献を調べるのが一つのやり方ですと言いたかったわけです。文献で詳細がわからないときは更に著者に聞いてみるのもいいかと思います。

(無題) 削除/引用 No.12495-3 - 2024/08/07 (水) 23:56:18 - 細胞初心者 >[Re:2] おおさん ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.12495-2 - 2024/08/07 (水) 12:49:42 - おお HepG2 cells (6 × 106) were mixed with 10 μg pLV-UBI-MCS-3Flag-EF1-EGFP-PER1 and 10 μg pLV-UBI-MCS-3Flag-EF1-EGFP-PER2 (Transheep, Shanghai, China) in Opti-MEM (Gibco). The mixture was placed in 2-mm gap cuvettes. The cell suspensions were electroporated at 170 V for 5 ms using a NEPA21 electroporator (Nepa Gene). doi: 10.1016/j.trsl.2020.02.003 For electroporation, cells were washed twice with ice-cold phosphate-buffered saline (PBS) and resuspended at a density of 1.5 × 107 cells/ml. Subsequently, 400 μl of the cell suspension was mixed with 5 μg RNA and transferred to a 2-mm electroporation cuvette (Bio-Rad). The following parameters were used for square wave electroporation: 900 V, 100 μs, and 2 pulses within 5 s (Gene Pulser Xcell electroporation system; Bio-Rad). DOI: 10.1128/jvi.00733-19

AML12 electroporation 条件について 削除/引用 No.12495-1 - 2024/08/07 (水) 11:40:09 - 細胞初心者 肝臓の株化細胞であるAML12細胞に対してelectroporationを用いて遺伝子導入しようと考えています。 cell 1.0×10^6に対してプラスミド10μg導入する予定です。 poring pulse, transfer pulseどちらの条件についても適正な条件がわかっていない状態です 。 もしAML12細胞やhepatocyte細胞を用いてelectroporationのご経験がある方はpulse条件についてご助言いただけると幸いです。 よろしくお願いいたします。

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