Bio Technical フォーラム

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(無題) 削除/引用
No.12482-3 - 2024/08/01 (木) 15:40:20 - wwn
iBlot2, iBind(2台)を使用しています。
他は使用した事がないので判断しにくいですが、BioRadのものは動画があるのでみてみました。
使い勝手はiBlot2の方が良い様に思えます。
消耗品が入ってきているトレイごと使って、全て使い捨てなので汚れる部分はほぼありません。
拭き上げるとしたら、ゲルを移す際に雫が垂れた場合などだけです。
ミニゲルサイズより小さい物は乗せられると思います。
現行はiBlot3なのですが、トレイごと使い捨てというのは同じ様です。
なお、転写を失敗したことはありません。
転写時間は6minほどです。(この辺りは調整できるようですが、毎回同じ設定で行っています)
iBindは自身で液交換などをせず、セットすればほったらかしで2次抗体まで染めてくれます。
逆にいうと、使用し始めると終わるまで占有されます。
また、これも消耗品が専用の使い捨てなので、ランニングコストはかかると思います。
それにblocking剤も専用のものがあります。
これに関しては好きなやつでもできそうな気はしますが、やった事はないです。
私は、従来法でやるより断然綺麗に染まっています。
2次抗体洗浄まで、90分くらいです。
メンテナンスは多少のふきあげと、溶液を入れる部分(金属、磁石による着脱)の水洗い程度です。
もし研究室を移動する事があっても、このセットを使いたいと思っています。

(無題) 削除/引用
No.12482-2 - 2024/08/01 (木) 11:49:50 - あの
BioRadのトランスブロットターボを使っています。一度だけ、アトーのゲルとバイオラドの転写パックの組み合わせ使ったことありますが、使えています。無駄になるメンブレン領域が生じますが。

アトーのゲルはバリエーションが豊富なので、全てがどうかは判りませんが、BioRadのトランスブロットターボは、通常のセミドライの転写装置同様に、電圧等をユーザーが自由に設定できるので、可能だろうと思います。


InvitrogenのiBindは購入したけど、当方が愛用している東洋紡のCan Get Signalを利用できるかどうか怪しいので、使っていないです。これは転写後のブロッキング等を自動化するものであって、トランスブロットターボ等とは違います。

結局のところ、商売上手なBioRadの製品で一式そろえて、それらがメインになっています。

ウェスタンブロットを高速化・簡便化する装置 削除/引用
No.12482-1 - 2024/08/01 (木) 10:45:16 - バチラス
現在、一般的なセミドライ方式でウェスタンブロットを行っていますが、学生との装置のバッティングが多く、ブロットを行う機会が増えたので、高速化・簡便化するための装置の購入を検討しています。
私自身で選定した候補装置は3つあるのですが(下記)、これらの装置について実際に使用経験のある方いましたら使用感を教えていただけないでしょうか。重視する項目は、(1)ランニングコスト、(2)実験の成否(安定してうまく行く、ムラが出るときがあるetc)、(3)メンテナンスの容易さ、です。また、下記の装置以外にオススメがあれば教えていただけないでしょうか。ゲルはミニゲルよりも一回り小さいATTOのコンパクトゲル(5x6 cm)を使っているので、一般的なミニゲル以外のサイズが利用できるかも教えていただけるとありがたいです。予算は潤沢ではないので、50万円以下だと助かります。注文が多くてすみませんがよろしくお願いします。

【候補機器】
i) BioRadのトランスブロットターボ
近辺で使用している人が複数おり、今のところ第一候補です。
ii) InvitrogenのiBlot
周りに使用者がおらず使用感が分かりません。
iii) InvitrogenのiBind
同上
iv) ミリポアのSNAPid
昔デモをやった時は、比較として自分で手で行ったデータの方がきれいでした。条件を検討すれば装置を利用してもきれいにできそうだとは感じています。本体の安価さは魅力です。
※ナカライのバレットシリーズなど試薬でスループットを上げることも検討していますが、ここでは装置について情報を収集したいので、装置について利用者目線の感想・ご意見などを教えていただければと思います。

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