BioTechnicalフォーラム [凍結乾燥抗体の溶解]

凍結乾燥抗体の溶解

No.12448-TOPIC - 2024/07/17 (水) 11:16:10 - 1st Ab

初歩的なことですみません。
購入した抗体のデータシートに以下のように記述されています。
Formulation: Lyophilized from a 0.2 micro-m filtered solution in PBS with Trehalose.
Reconstitution: Reconstitute at 0.2 mg/mL in sterile PBS.
これはPBSに溶解せよ、という指示かと思ったのですが、そうすると2xPBSになるように思われます。水に溶解して1xPBSにするという意味なのでしょうか？
　

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No.12448-10 - 2024/07/18 (木) 12:05:41 - 1st Ab

TT さん

情報ありがとうございます！
ホントですね、もとの液量がわかりました。
もとよりも5倍希釈になる計算のようです。
ちゃんと調べきれてませんでした。お恥ずかしい限りです。
すべての疑問が解決しました。

皆様ありがとうございました。

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No.12448-9 - 2024/07/18 (木) 11:44:38 - TT

> もとの液量はわからないです。
説明文章からR&D Systemsの抗体ですよね？そうだとすると、webからロット番号を入力してCOA(Certificate of Analysis Lookup)を見ると書いてあるはずですよ。

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No.12448-8 - 2024/07/18 (木) 08:45:36 - 1st Ab

Zzz さん

コメントありがとうございます。同時に購入した2次抗体の溶解は水と書かれていたので（別メーカーですが）、Zzzさんのおっしゃるように塩だから水？と思った次第です。もとと濃度が違うということを思いつくことができませんでした。抗体は比較的強いタンパク質だと聞いたことがありますし、TSさんがおっしゃるようにたしかに多少PBS濃度が変わっても問題なさそうですね。

コメントを下さった皆様ありがとうございました。
なぜか解決ボタンが押せないのですが、これにて解決とさせてください。
もし関連するご意見などありましたら引き続き書き込みいただけるとありがたいです。

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No.12448-7 - 2024/07/18 (木) 07:08:19 - Zzz

0.2 mg/mlは精製したタンパク質溶液としては薄いので、下のお二方の意見が正しそうですね、失礼。

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No.12448-6 - 2024/07/18 (木) 04:14:01 - Zzz

sodium chloride and sodium phosphate buffer salts
ではないですか？塩だから水に溶かすのかと私は思いましたが、webのデータシートのリンクを貼れませんか？

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No.12448-5 - 2024/07/17 (水) 12:04:56 - 1st Ab

あさん
TS さん

早速のご返答ありがとうございます！
なるほど、もとよりも薄くなるように溶解するということなのですね。データシートにはsize（タンパク質量？）の情報しか書かれておらず（25 micro-g）、もとの液量はわからないです。reconstitutionの際はもとの液量と同じ容量に戻すものと勝手に思い込んでいました。

ありがとうございました。スッキリしました。

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No.12448-4 - 2024/07/17 (水) 11:53:58 - TS

1XPBSに溶解せよ、ということであっていると思います。
たぶん「あ」さんが書いているように、凍結乾燥前のボリュームが小さかったのではないですかね。
抗体のストック液だし、1Xから多少ずれても問題ないと想像します。

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No.12448-3 - 2024/07/17 (水) 11:36:21 - あ

凍結乾燥する前の濃度が濃いとＰＢＳに溶かさないとＰＢＳが薄まるという意味でかきました

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No.12448-2 - 2024/07/17 (水) 11:34:22 - あ

0.2 mg/mLにするためにはPBSに溶解しないと１ｘＰＢＳにならないのではないですか。
抗体のタンパク質量が書いてありませんけど。