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(無題) 削除/引用 No.12433-16 - 2024/07/12 (金) 00:10:23 - PTBS >[Re:15] あのさんは書きました : > 培養用のPBSはオートクレーブしかしないです。 > フィルター代がもったいない。 > それから適切な使用をすると、”溢れ出たりゴミが残る”ことはないはずです。 そうですか。参考にさせていただきます。ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.12433-15 - 2024/07/11 (木) 09:42:12 - あの 培養用のPBSはオートクレーブしかしないです。 フィルター代がもったいない。 それから適切な使用をすると、”溢れ出たりゴミが残る”ことはないはずです。

(無題) 削除/引用 No.12433-14 - 2024/07/11 (木) 06:21:15 - おお >本当に全部菌がフィルターに残るのか不安で、みなさんはどうしていますか？ そこでトラブルになったと思えることは一度もなかったです。あえていうとマイコプラズマは通ってしまう可能性があるので0.1umのフィルターを通すということも最近はやられているようです。わたしは大抵は0.２umで対応してます。

(無題) 削除/引用 No.12433-13 - 2024/07/11 (木) 04:00:34 - PTBS >[Re:12] おおさんは書きました : > 前のボスがオートクレーブ滅菌マンだったので、、、 > フィルター使うぐらいなら滅菌済みで売っている溶液買うっていうのも、、、割高でしょうけど。 > > それと、ホコリが入っているとのことですが、無菌にしなくとも 普段は細胞培養用のPBSは滅菌済みのものを買っているのですが、粉も余っているし作成もそれほど難しくないのでしばらく自作して節約しようかなと思いました。オートクレーブ滅菌は好きなのですが溢れ出たりゴミが残るのが気になるかな、と。フィルターも簡単でいいのですが、本当に全部菌がフィルターに残るのか不安で、みなさんはどうしていますか？

(無題) 削除/引用 No.12433-12 - 2024/07/11 (木) 01:50:52 - おお 前のボスがオートクレーブ滅菌マンだったので、、、 フィルター使うぐらいなら滅菌済みで売っている溶液買うっていうのも、、、割高でしょうけど。 それと、ホコリが入っているとのことですが、無菌にしなくともSafety cabinet とかHEPAフィルターがあるような場所で作成すればそういうことがなくなるような気がしますがどうでしょう。

(無題) 削除/引用 No.12433-11 - 2024/07/10 (水) 23:52:54 - PTBS みなさま非常に参考になるご意見ありがとうございました。今一度研究室を見渡してうちに合った方法でやりたいと思います。 ちなみに、粉から作って細胞培養などで使いたくて滅菌する場合、滅菌用のフィルターに通して使いますか？それともオートクレーブ派ですか？あるいは両方やりますか？

(無題) 削除/引用 No.12433-10 - 2024/07/10 (水) 23:38:01 - おお >[Re:9] wさんは書きました : > 10xPBSを作成する際はpH合わせてません。1xに希釈すると自動的にpH7.4くらいになると思います。 私もそう言い続けてきた経緯があるのですが、合わせないとphが合わないレシピがあります。

(無題) 削除/引用 No.12433-9 - 2024/07/10 (水) 18:45:28 - w 10xPBSを作成する際はpH合わせてません。1xに希釈すると自動的にpH7.4くらいになると思います。

(無題) 削除/引用 No.12433-8 - 2024/07/10 (水) 18:17:50 - G25 今どきの試薬で「ホコリ」の混じっている製品はないと思います。 10xや20xのストック溶液も作りますが、ふつうは不溶物はでません。 でも、以前、実験のお手伝いの人が水道水でPBSを作ってしまったことがあって、そのときは白い雲のような不溶物が出て何事かと思いました。カルシウムとかマグネシウムがリン酸と難溶性の塩を作っちゃうんだと思います。 ひょっとして、水のクオリティが低いとか、試薬ビンに水垢がついているとかでないですか。 それなりのボリュームの溶液を脱粒子のためにろ過するときは、 ディスポのボトルトップフィルターとかフィルターユニットで減圧濾過します。一本で1500円くらいするけど、費用対効果は悪くないと思う。

(無題) 削除/引用 No.12433-7 - 2024/07/10 (水) 17:16:24 - おお 確かに埃が入るって不思議ではありますが、作業環境によるのかもしれないので強くはいいませんけど。滅菌が必要とかで無い限りフィルターとかかけないですけどね。

(無題) 削除/引用 No.12433-6 - 2024/07/10 (水) 10:05:42 - あの 長年、10倍PBS液や、10倍TBS液を粉から作っていますが、これらはフィルターなんて通さないです。しかも10倍PBS液は、室温に保管しています。アザイド等の防腐剤も入っていないです。 それでも、”ホコリのようなものが溶液に入っている”状態になることはないです。 最初に綺麗に洗ってオートクレーブしたメディウム瓶を使いはじめましたけど、その後は、特に洗いもせずに、再使用しています。 たぶん塩濃度の薄い、1倍液だと、カビとかいろいろ増えてくるのだと思います。 なお経験上、冷蔵庫に入れていてもゼラチン入りＰＢＳはすぐにカビが生えます。 以上、参考になれば幸いです。

(無題) 削除/引用 No.12433-5 - 2024/07/10 (水) 08:53:15 - PTBS >[Re:2] おおさんは書きました : > https://www.amazon.com/Buchner-Funnel-Filtering-Filter-Adapter/dp/B0CCXPP2FJ?th=1 > > こんなやつないですかね。こんなやつないですかね。Buchner FunnelにVacuum Flaskを組み合わせる。 > あー、あったかもしれません・・・もう一度探してみます。このボツボツの漏斗の下の三角部分がなくて、ボツボツの円柱みたいなプラスチックの丸いものはあるのですが、これってそういうフィルターの部品ですよね？ >[Re:4] TSさんは書きました : > ワットマンのろ紙は使えないけど、メンブレンフィルターでこうゆうのもあります。メンブレンフィルタだけ買えば、リユースできます。うちはいまだにたまに大量滅菌するときは、これなんだけど。孔径が大きいものを買えば、プレフィルターのように使えます。まだ売ってた。。。 > > https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/jp/ja/DS0320-5045 なるほど。滅菌用はいつも使い捨てのフィルターを使っていますがリユースできるものもあるのですね、知りませんでした。滅菌用ではフィルターを買って土台となるカップ部分とフィルターをオートクレーブして、フィルターをセットして流すんですね。ピンセットでフィルター1枚取って入れるのですか？滅菌用じゃない場合も簡易的なフィルターをつけて部屋で使えそうですね・・・ 非常に参考になるご意見ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.12433-4 - 2024/07/10 (水) 08:20:29 - TS ワットマンのろ紙は使えないけど、メンブレンフィルターでこうゆうのもあります。メンブレンフィルタだけ買えば、リユースできます。うちはいまだにたまに大量滅菌するときは、これなんだけど。孔径が大きいものを買えば、プレフィルターのように使えます。まだ売ってた。。。 https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/jp/ja/DS0320-5045

(無題) 削除/引用 No.12433-3 - 2024/07/10 (水) 07:28:40 - おお 無責任に言うのだけど、一度使った滅菌用のフィルターで膜の部分を破いてきれいにしてからろ紙乗っけたら使えるかしら。

(無題) 削除/引用 No.12433-2 - 2024/07/10 (水) 07:27:12 - おお https://www.amazon.com/Buchner-Funnel-Filtering-Filter-Adapter/dp/B0CCXPP2FJ?th=1 こんなやつないですかね。こんなやつないですかね。Buchner FunnelにVacuum Flaskを組み合わせる。

簡易的なフィルター使っていますか？ 削除/引用 No.12433-1 - 2024/07/10 (水) 06:45:54 - PTBS いつも参考にしています。 PBSやTBSを粉から作った場合、（普段は10xを買って水で希釈するのですが、粉が大量に余っているので自作しようと。）粉を溶かしてpHを合わせたあと、ホコリのようなものが溶液に入っているのが気になります。免疫染色やウエスタンで使うつもりですので滅菌用のフィルターは必要ないのですが、みなさんは何か簡易的なフィルターなどしていますか？ワットマンの丸いフィルターがあるので理科の実験のように漏斗でやったこともあるのですが、いかんせん時間がかかってイライラします。バキュームシステムを使っていますか？（どうやって？）なにかいいシステムやアイデアがありましたらシェアしていただければと思います。

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