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(無題) 削除/引用 No.12410-5 - 2024/06/29 (土) 02:33:18 - cc 浮遊細胞を扱っていたときにデブリを取り除きたくFicollを使ってみたのですがうまくいきませんでした。マグネットビーズで死細胞と分ける方法も試しましがうまくいっているのかわからず。難しいですよね。いい方法があればいいのですが。

(無題) 削除/引用 No.12410-4 - 2024/06/29 (土) 02:11:39 - おお ピペッティングをしているというのは、できた細胞の塊を何らかの理由で崩しているということでしょうか（塊を割って塊を増やすって感じ？）。確かに大きくなっていく一方では実験としても何を見ているのかわからなくなりそうではありますね。 細胞塊を回収するのであれば静置でいいかと思いますが、砕いたものがどれくらいの塊になっているのかによるかもしれません。シングルCellってことはないのかなとは思いますけど。 それでもデブリの方も大きいもの、密度の高いものなどあるかもしれませんので、結構交じる可能性はありますね。 フィコールやパーコールを利用した密度による選別はより良いかもしれません。こういう細胞塊って密度的にはどれくらい幅があるんでしょうかね。この手の実験はかじったことがある程度なのでなんとも言えませんがそういう方法論は見たことがないですね。。。見たことがないからだめだとか言うつもりはないし、誰もやってないけど結構いい方法かもしれないというのもあるので、否定はいたしません。

(無題) 削除/引用 No.12410-3 - 2024/06/28 (金) 21:22:55 - fbn 組織をバラバラにして単一細胞とごく小さな組織塊を分ける時に使うメッシュのフィルターは使えませんか。この場合は通常の目的用途とは逆で、細胞塊はフィルター上に残り、デブリスは濾過されることになります。さらにフィルター上で新しい培地を数回流してで洗うことで、残ったデブリスもほぼなくなるのではないかと。網目の大きさの違うものでどれが良いか検討する必要はあるかもしれないですが、デブリスならば細胞よりは小さいと思うので濾過されると思うし、いけそうな気がします。

(無題) 削除/引用 No.12410-2 - 2024/06/28 (金) 19:19:44 - Tr デブリが何かわからないが、死細胞とかマトリックス成分だとすると密度的にはこれらの方が重たいので上清には来ないような気がしますが…。むしろ、Ficollなどの密度勾配液で沈降させるべきなのでは？

細胞培養のデブリの除去 削除/引用 No.12410-1 - 2024/06/28 (金) 19:09:35 - 細胞培養 お疲れ様です。 細胞を凝集塊の状態で培養しており、培地交換の度にピペッティングを行うため、結構デブリが出てきます。なので細胞培養の継代時の遠心で細胞だけ下に集め、デブリを上清に残したいのですが、みなさんはどんな回転数でいつも継代時の遠心されてますか？

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