全4件 ( 1 〜 4 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.12356-4 - 2024/06/08 (土) 10:32:22 - もも マウンティングに何を使ったかにもよります。Prolongシリーズなどは硬化ではなく、「乾燥」が近いので水につければすぐ取れますから、また2次抗体を乗せることは多分可能です。（硬化しないマウンティングならマニキュアを剥がして終わりかも？） ストリッピングはしなくても、2次抗体をまた乗せればOKだと思います。

(無題) 削除/引用 No.12356-3 - 2024/06/05 (水) 19:55:17 - ICC >G25様 ありがとうございます。 こちらの説明足らずで大変申し訳ございません。 染色しているものは確実に染まるもので、プレ実験にて染色も確認しておりました。しかし、今回試薬処理群を加えて行ったところ、同じプロトコール、共焦点の条件も同じで行いましたが、染まらなかったので、もしかしたら希釈倍率を間違えたのではないかと考えました。 この場合、染まらなかった細胞をまたブロッキング〜一次抗体反応〜二次抗体反応とやり直していいものか、と思い、質問いたしました。

(無題) 削除/引用 No.12356-2 - 2024/06/05 (水) 17:41:16 - G25 >うまく染まりませんでした。 とは？　何が起こったんでしょうか？ 希釈をまちがえたとか二次抗体を間違えたとか断じた根拠は？ どういう間違いだった可能性が高いのですか。 例えば、一次抗体が薄すぎで全然染まってないというなら、そのまま濃い一次抗体でやり直すのがストレートでしょうし、二次抗体が一次抗体の免疫動物種にあっていなかったと言うなら、正しいもので二次抗体からやり直したらいいでしょう。 そもそも、標本と抗体は確実に染まる、ポジコン的なものなんでしょうね。 その共焦点のセッティングでちゃんとした染色標本では像が観察できているんですよね （ときに学生が何も見えないと言いつけにきたものの、単にセッティングや操作を間違っていただけということもある）。

免疫細胞染色の再染色 削除/引用 No.12356-1 - 2024/06/05 (水) 11:37:50 - ICC お世話になっております。 先日より、私の所属しているラボで共焦点を導入したことで、免疫染色ができるようになりました。 しかし、細胞で免疫染色を行ったのですが、一次抗体の希釈倍率を間違えたのか、二次抗体（Alexa Fluor 488）を間違えたのか、うまく染まりませんでした。この場合、ウェスタンブロットでいうストリッピングのような作業を行い、再度同じサンプルで免疫染色を行うことはできるのでしょうか。 よろしくお願いいたします。

全4件 ( 1 〜 4 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---