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Transblot Turboを自作のbuffer等で行っている方はいませんか?
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No.12324-TOPIC - 2024/05/20 (月) 17:37:49 - 転写マン
お世話になっております。
Bio-radのTransblot TurboというWB転写用機械なのですが、
濾紙とPVDFメンブレンのキットを自作している方はいらっしゃいませんか?
転写が綺麗に、かつ短時間 (10分ほど)で終了するので、重宝して日々使っているのですが、ランニング金額を考えますと少々お高くつくもので...
海外で自作している方の情報等もインターネット上で目にしましたが、
もし同じようなことをされている方がいらっしゃいましたら、
Buffer組成や条件など、共有していただけると大変ありがたく思います。
よろしくお願いします。
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(無題)
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No.12324-11 - 2024/05/22 (水) 08:37:52 - おお
>[Re:8] あのさんは書きました :
> でもリンク先のは、次なので、10分未満ではないですね
>
> 20 minutes at 1.3 A, Max. 25V for one mini-gel transfer
> 20 minutes at 2.5 A - Max. 25V for two minigels transfer.
なるほど。レシピは明かされてないのかもしれませんね。
(無題)
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No.12324-10 - 2024/05/22 (水) 08:36:36 - おお
https://www.bio-rad.com/webroot/web/pdf/lsr/literature/10020688.pdf
20 | Trans-Blot Turbo Transfer System Using the Trans-Blot Turbo Transfer System
3.6 Transfer Using Traditional Semi-Dry Consumables
Typical procedure utilizing the Trans-Blot Turbo System and conventional semi-dry western blotting consumables is detailed below:
1. Equilibrate the gel in Towbin transfer buffer (25 mM Tris, 192 mM glycine pH 8.3,
20% MeOH) for 10 min...
(無題)
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No.12324-9 - 2024/05/21 (火) 14:09:53 - mont
以下のリンクを参考にどうぞ。濾紙は日本では入手が難しいかもしれませんが。
http://www.kenkyuu2.net/cgi-biotech2012/biotechforum.cgi?start=24;mode=view;Code=9075
(無題)
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No.12324-8 - 2024/05/21 (火) 12:19:00 - あの
でもリンク先のは、次なので、10分未満ではないですね
20 minutes at 1.3 A, Max. 25V for one mini-gel transfer
20 minutes at 2.5 A - Max. 25V for two minigels transfer.
(無題)
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No.12324-7 - 2024/05/21 (火) 07:54:03 - あの
おおさんが示してくれているリンク先の キンバリークラークのワイプオールは、
たぶん日本製紙セルシアの次と同じだと思います。アマゾンとかで千円ぐらいで買えそうです。
https://pro.crecia.co.jp/search/non-woven_wiper/non-woven_wiper/url35
(無題)
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No.12324-6 - 2024/05/21 (火) 03:37:07 - おお
https://www.protocols.io/view/trans-blot-turbo-transfer-with-home-made-buffers-dm6gpz51lzpn/v1
こんな感じか?
(無題)
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No.12324-5 - 2024/05/20 (月) 23:24:09 - たこ
ごくごく一般的な条件で使っていますが。
Tris-Gly-20%MtOHのtransfer bufferを使用、milliporeのPVDFロールを購入して適当な大きさにカット、ワットマンのロール濾紙をカットまたはBioradのカット済み濾紙を使用。
これで普通に転写はできてます。
ターゲットのタンパク質が10分でできるかはわかりませんが。
(無題)
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No.12324-4 - 2024/05/20 (月) 22:50:55 - E
> 海外で自作している方の情報等もインターネット上で目にしましたが、
> もし同じようなことをされている方がいらっしゃいましたら、
その「海外で自作している方」がどのような自作をしているのこちら側はかわかりませんので、こちらが同じようなことをしているのかどうか判断ができません。
(無題)
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No.12324-3 - 2024/05/20 (月) 21:55:43 - E
> Buffer組成や条件など、共有していただけると大変ありがたく思います。
Transblot Turboの説明書に載っている条件で十分だと思いますよ。
(無題)
削除/引用
No.12324-2 - 2024/05/20 (月) 21:45:49 - E
> 濾紙とPVDFメンブレンのキットを自作している方はいらっしゃいませんか?
濾紙とPVDFメンブレンのキットを自作?濾紙は濾紙で買ってメンブレンはロールで買ってゲルサイズで切って使っています。一度買えばそれほど高くはないような?
Transblot Turboを自作のbuffer等で行っている方はいませんか?
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No.12324-1 - 2024/05/20 (月) 17:37:49 - 転写マン
お世話になっております。
Bio-radのTransblot TurboというWB転写用機械なのですが、
濾紙とPVDFメンブレンのキットを自作している方はいらっしゃいませんか?
転写が綺麗に、かつ短時間 (10分ほど)で終了するので、重宝して日々使っているのですが、ランニング金額を考えますと少々お高くつくもので...
海外で自作している方の情報等もインターネット上で目にしましたが、
もし同じようなことをされている方がいらっしゃいましたら、
Buffer組成や条件など、共有していただけると大変ありがたく思います。
よろしくお願いします。
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