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H2O2のmol濃度 トピック削除
No.12313-TOPIC - 2024/05/14 (火) 23:14:11 - c
ものすごく基本的な質問ですが、、

細胞を200μMのH2O2で刺激する実験を考えています。
例えば200μMのH202 1mlを作成するには、市販の30%H2O2をどのように希釈したらよいでしょうか。
 
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(無題) 削除/引用
No.12313-7 - 2024/05/15 (水) 09:27:36 - LPS
Sigmaで売られているH2O2は、わずかに安定剤が入ってたりします。
大雑把に濃度を知りたいなら、pH試験紙みたいな試験紙が売ってます。

(無題) 削除/引用
No.12313-6 - 2024/05/15 (水) 08:56:40 - おお
>[Re:5] vbyぬさんは書きました :
> 240nmでの吸収度(Abs)で測定できます。過酸化水素のモル吸光係数(e)は43.6のようです。

数値が報告によってばらついているようです私はちょっと違った数値を使ってました。
https://www.researchgate.net/post/Too_many_different_values_for_H2O2_extinction_coefficient_Which_one_is_correct

昔はこういう数値は自分で調べるとき、なかなか数値が見つからなかったんですが、最近は試薬屋のホームページに明記されていたりして探すのが簡単になっている印象です。試薬やの数値は43.6と書いているものしか見つかりません(見た限りでは)のでこれに統一したほうがいいのかなと思えます。

240nmで定量できます 削除/引用
No.12313-5 - 2024/05/15 (水) 04:11:18 - vbyぬ
計算でもとめてもいいのですが、購入してからだいぶ時間の経ってるものだと分解して、濃度が、表示の濃度よりも低下してるかもしれませんので直接定量するのがいちばんよいようにもおもいます。
紫外部までカバーしている一般的な分光光度計を使って、過酸化水素溶液のモル濃度(C)は240nmでの吸収度(Abs)で測定できます。過酸化水素のモル吸光係数(e)は43.6のようです。Abs=eCL の公式から算出できます。 なお Lはセルの光路長(普通は1cm)です。一応、教科書やwebでブーゲ-ランベルト-ベールの式の説明も参照ください。
あとご存知と思いますが測定波長は紫外部領域なので測定の際はガラスセルでなくて石英セルをつかいましょう。

(無題) 削除/引用
No.12313-4 - 2024/05/15 (水) 03:46:52 - あの
おっと、和光で100ml入りをだしていました。
 販売元084-07441

それから別の500ml入りしかない商品には次の記載があります。

 密度約1.11g/ml(質量分率30%のとき), 約1.13g/ml(質量分率35%のとき)
 濃度質量分率30.0〜35.5% (Titration)(H2O2)

たぶんガス抜けすること想定して、新品のときは濃いめなのでしょうね。

EIAが目的なら無視できるけど、より厳密になる必要があるなら、濃度を測定した方が良さそうですね。

(無題) 削除/引用
No.12313-3 - 2024/05/15 (水) 03:17:17 - あの
トピ主さんの質問は、時たま出るみたいで、ググルと出てきますし、ここの過去トピにもありますよ。

 http://www.kenkyuu2.net/cgi-biotech2012/biotechforum.cgi?mode=view;Code=9584

ところで、日本では過酸化水素は、500ml入りしか販売していないのですが、他のラボではどのくらいの頻度で買い替えていますか? 値段は高いものではないのですが、、、

当方では、自作のEIAでしか使わないので、数年でも使いきれないです。ボトルキャップの周りにパラフィルム巻いて、さらにジプロックに入れておくと、HRPとTMBの系で、数年は冷蔵庫保存で大丈夫なのですが、ラベルやジプロックにダメージが出てくるので、多少はリークしていると思っています。

(無題) 削除/引用
No.12313-2 - 2024/05/15 (水) 01:05:52 - おお
30% H2O2 means 30 g H2O2 per 100 g, and since the density is 1.11, the molarity is ....

こんだけ情報があれば計算可能でしょう。ま、ググったらすぐに出てきます。

ただし、30%H2O2が正確に30%かは考えてみる余地があるとおもいます。保存中に抜けることはおそらくご存知かと思われますし、試薬屋としては30%と書いて29.5%だったら少ないとクレームもあるかもしれません。実際はかったら30%よりも多めに入ってたとことがあった記憶があります。
実際に測ってみるとより良いと私は思ってます。

https://usptechnologies.com/ultraviolet-absorption-spectrum/

H2O2のmol濃度 削除/引用
No.12313-1 - 2024/05/14 (火) 23:14:11 - c
ものすごく基本的な質問ですが、、

細胞を200μMのH2O2で刺激する実験を考えています。
例えば200μMのH202 1mlを作成するには、市販の30%H2O2をどのように希釈したらよいでしょうか。

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