Bio Technical フォーラム

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マイコプラズマ汚染除去法は? トピック削除
No.1228-TOPIC - 2012/12/08 (土) 07:00:14 -
よろしくお願いします。

他のラボから培養細胞の分与を受けました。その細胞を何度か継代培養をしました。その時に、培養液(ペニシリンやストレプトマシン入り)がクリーンベンチやインキュベータに付着した事があります。その時にはさっとキムワイプでふいてアルコールをスプレーしました。

分与の約3週間後に、その分与してくれたラボから、マイコプラズマのコンタミがでたという話を聞きました。

そのため、当方のラボにもマイコプラズマを持ち込んだのではないかと心配です。そこでマイコプラズマ汚染除去法を教えてください。

なお継代培養をしていた時には、培養液が濁るような明らかなコンタミは認められませんでした。マイコプラズマのコンタミの時にも培養液が濁ってみえるのでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.1228-5 - 2013/01/01 (火) 14:03:55 - おお
汚染しているかどうか確かめた方がいいよ。DAPIとかの染色でも分かる可能性はたかいし。

(無題) 削除/引用
No.1228-4 - 2013/01/01 (火) 10:49:20 - ま
滅菌できるものは全て滅菌をして、それ以外の実験台、クリーンベンチ、インキュベーター等は、オスバンでふいて様子をみる事にしました。

先に検出では 削除/引用
No.1228-3 - 2012/12/10 (月) 10:28:44 - ema
マイコ汚染していないものに試薬をいれてもあまりよくないと思います。(試薬もただじゃないし)先に、汚染を疑われている、また自分の実験室の細胞群に関してマイコ検出をしてからではないでしょうか?
PCR法でもケミルミ法でもいいです。
研究者の体に付いて汚染ということもよくあるので
数年に1回(さすがに毎年とはいわない)はどの研究室も検査はしたほうが良いと思います。
除去には私はMC-210を使用しています。
除去試薬を使用してもすでに細胞の性質が変わっている可能性はあるので、一番良いのは汚染していない時点での細胞をクリーンな環境で起こしなおして再度分与してもらうのが良いと思います。

(無題) 削除/引用
No.1228-2 - 2012/12/08 (土) 09:34:17 - おお
一度ちゃんとした本をお読みください。マイコプラズマは通常マンマルなどを観察しているような光学顕微鏡で、直接は見れません。

必要であるならば除去用の試薬もうっていますが、除去後細胞の性質が変わってないと保証の限りではありません。そう簡単には除去できないこともまあまああるようです。最近は特異性の高い試薬もでているようですが、使ったことがないのでなんともコメント差し上げられません。

マイコプラズマ汚染除去法は? 削除/引用
No.1228-1 - 2012/12/08 (土) 07:00:14 -
よろしくお願いします。

他のラボから培養細胞の分与を受けました。その細胞を何度か継代培養をしました。その時に、培養液(ペニシリンやストレプトマシン入り)がクリーンベンチやインキュベータに付着した事があります。その時にはさっとキムワイプでふいてアルコールをスプレーしました。

分与の約3週間後に、その分与してくれたラボから、マイコプラズマのコンタミがでたという話を聞きました。

そのため、当方のラボにもマイコプラズマを持ち込んだのではないかと心配です。そこでマイコプラズマ汚染除去法を教えてください。

なお継代培養をしていた時には、培養液が濁るような明らかなコンタミは認められませんでした。マイコプラズマのコンタミの時にも培養液が濁ってみえるのでしょうか?

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