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ノックアウトマウスの維持 トピック削除
No.12238-TOPIC - 2024/03/23 (土) 10:09:38 - LPS
ノックアウトマウスを使って実験をされているなかで、毎回購入するのではなくてコロニーを研究室で維持して用いられている方に質問です。バッククロスが済んでいないマウスを用いる場合は、ヘテロ同士の交配で得られたsiblingsを用いるのが原則だと思います。では、ここが知りたいところなのですが、バッククロスが済んだノックアウトマウスを使う場合、そのマウスはホモで維持されてますか?そのノックアウトマウスは、何世代か毎に、不測のミューテーションを避けるためにバッククロスをおこなっていますか?その頻度はどの位ですか。良かったら教えてください。当方はバッククロス済みのヘテロ交配ですが、ホモは繁殖可能なので、思案中なのです。
よろしくお願い致します。
 
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No.12238-5 - 2024/04/01 (月) 23:52:50 - LPS
アイデアをありがとうございます。
この方法ではバックグラウンドが不測の遺伝子変異によって、WTと異なる可能性が除外できないので、また、ヘテロをコントロールに用いている論文もたまに見かけますが、ヘテロがどのモデルにおいてもWTと異なる表現型が無いともわからないので、この方法は自分は避けたいと思います。ヘテロで維持して多数のWT、KOを同じコロニーから得る場合にはありですね。

(無題) 削除/引用
No.12238-4 - 2024/04/01 (月) 13:09:44 - あ
ko homo x hetで維持する手もあります。het交配よりko homoの産仔数は倍になります。

実験のコントロールは別に増やしたWTマウスかhetを使います。

(無題) 削除/引用
No.12238-3 - 2024/03/23 (土) 11:54:08 - LPS
やさん、
なるほど、ヘテロで維持して、必要なときにホモ同士で交配する。納得です。ヘテロ同士の交配からは、必要な数のホモを得るのに苦労しているので、この方法の導入を検討します。
ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.12238-2 - 2024/03/23 (土) 11:11:10 - や
十分に戻し交配が済んでいるのであれば、ヘテロ同士の交配をラインの維持に、WT同士およびKO同士の交配で実験に必要な数のマウスを作出をします。

Littermateではないですが、Littermateでなければ差の出ない現象はあまりに表現型が弱く追うリスクが高いのではとおもいます。

もちろんLittermateで十分数を担保できれば必要はないですが。

ノックアウトマウスの維持 削除/引用
No.12238-1 - 2024/03/23 (土) 10:09:38 - LPS
ノックアウトマウスを使って実験をされているなかで、毎回購入するのではなくてコロニーを研究室で維持して用いられている方に質問です。バッククロスが済んでいないマウスを用いる場合は、ヘテロ同士の交配で得られたsiblingsを用いるのが原則だと思います。では、ここが知りたいところなのですが、バッククロスが済んだノックアウトマウスを使う場合、そのマウスはホモで維持されてますか?そのノックアウトマウスは、何世代か毎に、不測のミューテーションを避けるためにバッククロスをおこなっていますか?その頻度はどの位ですか。良かったら教えてください。当方はバッククロス済みのヘテロ交配ですが、ホモは繁殖可能なので、思案中なのです。
よろしくお願い致します。

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