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DNA抽出 boiling法に関して トピック削除
No.1221-TOPIC - 2012/12/05 (水) 23:00:16 - DNA抽出 boiling 法
最近、バクテリアのDNA抽出でboiling法(要は温度を上げるだけ)なるものを発見しました。これを哺乳類細胞に適用することは可能でしょうか?
不可の場合、バクテリアと哺乳類細胞では何が違うのでしょうか?
 
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御礼 解決済み 削除/引用
No.1221-7 - 2012/12/07 (金) 07:32:13 - 感謝
皆様

いろいろとご意見ありがとうございました
哺乳類細胞とバクテリアの違いはよくわからないままですが
いろいろとご紹介していただき
勉強になりました
皆さんからいただいた情報をもとにもうすこし自分でも調べてみたいと思います

(無題) 削除/引用
No.1221-6 - 2012/12/06 (木) 14:43:50 - おお
たしかにマウステイルから DNA抽出するときはボイルする方法があるんですよね。

でも培養細胞だったら、そこまでやらなくてもTEにけんだくして微量とってそのままPCRしてもかかりそうな気がします。

アルカリ法 削除/引用
No.1221-5 - 2012/12/06 (木) 11:41:59 - ema
http://www.toyobo.co.jp/seihin/xr/lifescience/products/product/jisshirei/archives/2008/12/kod_fx_13.html

(無題) 削除/引用
No.1221-4 - 2012/12/06 (木) 06:42:48 - おお
そもそも温度おあげなくても、デタージェントや高塩濃度でマンマルのゲノムは可溶画分にきますけど。

(無題) 削除/引用
No.1221-3 - 2012/12/06 (木) 04:41:30 - KY
目的がわかりませんが、ゲノムPCR程度なら、
ほ乳類細胞でも、96wellの細胞に界面活性剤とProKを100ulぐらいでちょろっと反応させて、ボイルして、1ulぐらい使ってPCRすることならできます。
ESのスクリーニングとかに使用されているはずです。

(無題) 削除/引用
No.1221-2 - 2012/12/06 (木) 03:47:29 - おお
>[Re:1] DNA抽出 boiling 法さんは書きました :
> 最近、バクテリアのDNA抽出でboiling法(要は温度を上げるだけ)なるものを発見しました。これを哺乳類細胞に適用することは可能でしょうか?
> 不可の場合、バクテリアと哺乳類細胞では何が違うのでしょうか?
>

バクテリアのばあいは、プラスミドを抽出する方法で、その方法ではバクテリアの染色体(ゲノム)は取り除かれると思いますが、、、そうすると同様にその方法がワークするなら哺乳類細胞ではDNAはほとんど取り除かれることになりますよね、、、

まあエピソーマルなものはどうかわかりませんけど。

DNA抽出 boiling法に関して 削除/引用
No.1221-1 - 2012/12/05 (水) 23:00:16 - DNA抽出 boiling 法
最近、バクテリアのDNA抽出でboiling法(要は温度を上げるだけ)なるものを発見しました。これを哺乳類細胞に適用することは可能でしょうか?
不可の場合、バクテリアと哺乳類細胞では何が違うのでしょうか?

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