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(無題) 削除/引用 No.12195-5 - 2024/03/08 (金) 18:01:15 - bghんjm 立ち上がるまでかなり長い時間かかると思うけど、気長に待つ。一旦、増殖をはじめれば、あとは順調に指数関数的に増えていく。株細胞はそういう点ではかなりタフ。すでに指摘があるように、安定発現株のクローニングをする際などは限界希釈法で１ウェルに細胞１個まで希釈して、そこから増やしていくわけで、それ考えたら５個あるなら余裕と思う。 仮に増殖がうまくいったとして、その細胞を今後実験に使う際、培養細胞の細胞集団を構成する一つ一つの細胞レベルでは必ずしも遺伝的に均一ではないので、今回のような場合、特定のクローンが優勢な細胞集団になっている可能性があることは、実験の目的や性質によっては結果を解釈する際には留意したほうが良いと思う。

(無題) 削除/引用 No.12195-4 - 2024/03/07 (木) 04:04:19 - おお >[Re:3] 細胞さんは書きました : > 5細胞を96ウエルプレートの1つに入れて、50マイクロリットルくらいの少量の培地でしばらく培養してみてはどうですか？ 384 wellだとなおいいが、いま例えば６Wellとかで培養していてReseedできるかという問題をどう考えているのだろうか

細胞の再生 削除/引用 No.12195-3 - 2024/03/06 (水) 10:56:17 - 細胞 5細胞を96ウエルプレートの1つに入れて、50マイクロリットルくらいの少量の培地でしばらく培養してみてはどうですか？ 細胞自身が分泌する成長因子でうまくいけば増えるかもしれません。 ただ、一度減って厳しい環境に置かれた細胞は増えるとしても時間がかかると思います。 頑張って下さい。

(無題) 削除/引用 No.12195-2 - 2024/02/29 (木) 00:39:28 - おお 実験で必要に応じてシングルクローンから増やす事があるぐらいだから、、、 ただしその不備の影響が尾をひいてなければだけど。 Conditioned media とか、若干血清濃度を上げるとか、はよくやられると思う。 また、以下の論文だとTGFbeta がサバイバルに関与しているらしい。 そういう増殖因子も使われることはあると思う。 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12386814/ ただ、増えてきたからと言って使えるのか？と言うのがあるけど。凍結バックアップがないのなら、それもなんだかなぁって気がする。

Mda-mb-231細胞を生き残らせる方法 削除/引用 No.12195-1 - 2024/02/28 (水) 22:06:56 - ひとし 上記細胞が実験操作の不備により激減しました。 残り5細胞ほどです。 生き残らせる方法はありますか？ 特殊な遺伝子が組み込まれていますが、生存には影響しません。 Y27632処理はあまり効果がなく、次の操作が最終トライになりそうです。

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