一つお教えいただきたいのですが、マウスの脳で凍結切片を作成し免疫染色を行う予定です。一般的には脳を取り出したのちにPFAで固定し、その後sucroseで置換しOCTに包埋しますが、事情により既に脳を半分に切ってなんの処理もせずに-80度に置いております。これを使って免疫染色をしたいのですが、その手順についてお伺いしたいです。今考えているのは凍結組織をOCTに包埋して切片を作成し、乾燥。その後固定する予定です。sucroseの置換ができないので組織にダメージが生じると思われますが、このような方法で免疫染色を行った方はおられますか?またその際の結果をお教えいただけますと助かります。 |
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