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LPS リポポリサッカライドについて トピック削除
No.12183-TOPIC - 2024/02/21 (水) 01:19:00 - かえる
初心者です。
LPSをマウスに注入する研究を開始します。

以前のレスで、あまり高濃度での希釈はミセル化を形成するとのコメントをみました。
現在、生食で2.5mg/mlで希釈し、-80度で凍結保存を検討しています。2.5mg/mlはミセル形成のリスクがありますでしょうか。

また1mg/mlの濃度で希釈し、後に更に高濃度で使用したい場合、どのように濃縮すれば良いでしょうか。

ご迷惑をおかけします。何卒宜しくお願い申し上げます。
 
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(無題) 削除/引用
No.12183-4 - 2024/02/21 (水) 09:11:02 - おお
濃縮は結構難しいというかできるかどうかよくわかりませんが、手っ取り早いのはSpeedvacで水分をとばすのがシンプルではあるとおもう。しかしながら塩類も濃縮されるし、揮発しやすいバッファー成分があるならそれも飛んで溶液のpHが変わると思う。

もう一つあり得るのは透析の膜を隔てて浸透圧の高い溶液に接触させる。生食中というのを維持したければ生食にPEG(透析膜を透過しない大きさのもの)を加えて浸透圧を上げれば、生食は透析膜の間で平衡を保てるけど、PEGの影響で水分は膜を通過してPEG溶液の方に移動する。念の為PEG溶液はあらかじめ生食で透析してPEG中に含まれるPEG断片とか?をのぞたほうがよさそう。

LPSの精製方法などを検索すると沈殿させる方法も見つかるが、もとの成分が維持できているか微妙。ロスもあるかもしれないし。まあ自身で調べてみてそれで良さそうならそうしたらいい。

(無題) 削除/引用
No.12183-3 - 2024/02/21 (水) 03:52:59 - おお
https://www.researchgate.net/figure/Structure-of-LPS-aggregates-In-aqueous-solution-monomecric-LPS-molecules-form-aggregates_fig2_349409516

こんなんあったわ。

カルシウムなどのイオンがあるとミセルを作りやすいらしい。なのでキレーターを入れたりするといいらしい。
その論文はこれ
https://www.nature.com/articles/s41598-021-83487-4

plasma中ではCitrateが有効ですが、これもいわゆるキレーターですよね。

Tweenなどでも有効とありますがTweenはミセルを作るだろうけど、そこに取り込まれるからLPSミセルの効果がないということだろうか。Tweenを含めて投与経路によるかもしれないが使えるとは思う。しかし投与したあとに拡散していく過程でミセルができる可能性を考えるとキレーターとかは使いにくいかも。

(無題) 削除/引用
No.12183-2 - 2024/02/21 (水) 02:35:54 - おお
ようわからんけど、ミセル作るもんだと思ってるんだけど、、、ミセルで困る理由は何でしょうか?

LPS リポポリサッカライドについて 削除/引用
No.12183-1 - 2024/02/21 (水) 01:19:00 - かえる
初心者です。
LPSをマウスに注入する研究を開始します。

以前のレスで、あまり高濃度での希釈はミセル化を形成するとのコメントをみました。
現在、生食で2.5mg/mlで希釈し、-80度で凍結保存を検討しています。2.5mg/mlはミセル形成のリスクがありますでしょうか。

また1mg/mlの濃度で希釈し、後に更に高濃度で使用したい場合、どのように濃縮すれば良いでしょうか。

ご迷惑をおかけします。何卒宜しくお願い申し上げます。

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