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血管内皮細胞の培養で粘液質な分泌物はありますか? トピック削除
No.1214-TOPIC - 2012/12/04 (火) 09:51:26 - 血管内皮
お世話になります。
現在、primary cultureでmouse大動脈より血管内皮細胞を単離しました。
そのその細胞は血管内皮が増える培地で買うとドミナントに増殖し、ほぼ全てがCD31+であることを確認しています。

一つ気になる点があります。
fleshな培養液に換えて、2-3日培養し、再びfleshな培地と交換するため古い培地をdishを傾けて吸引すると最期の方にドロドロっとしたものを吸っているようです。

始めは、細胞がシート状に剥がれて、それを吸ってしまっているのでは?と思いましたが、そうではなさそうです。どなたか、初代培養細胞を行われている方で、このような現象を体験した方いらっしゃいませんでしょうか?

ムチン様の粘液質でも分泌しているのでしょうか。。

ちなみに培地は、
自家製のRPMI1640(P/S+)に
FBS 20 %, endothelial cell growth supplement (ECGS) 75 ug/ml, Heparin 5 IU/mlです。
 
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(無題) 削除/引用
No.1214-2 - 2012/12/04 (火) 11:57:56 - おお
primary cultureでよくあり得るのは、(おそらく細胞を調製している過程で)死んだ細胞のDNAがまじることです。お示しの細胞でのプライマリーの経験はございませんが、、、細胞調製過程でDNaseIを入れることもほかのプライマリーカルチャーではよくあります。

血管内皮細胞の培養で粘液質な分泌物はありますか? 削除/引用
No.1214-1 - 2012/12/04 (火) 09:51:26 - 血管内皮
お世話になります。
現在、primary cultureでmouse大動脈より血管内皮細胞を単離しました。
そのその細胞は血管内皮が増える培地で買うとドミナントに増殖し、ほぼ全てがCD31+であることを確認しています。

一つ気になる点があります。
fleshな培養液に換えて、2-3日培養し、再びfleshな培地と交換するため古い培地をdishを傾けて吸引すると最期の方にドロドロっとしたものを吸っているようです。

始めは、細胞がシート状に剥がれて、それを吸ってしまっているのでは?と思いましたが、そうではなさそうです。どなたか、初代培養細胞を行われている方で、このような現象を体験した方いらっしゃいませんでしょうか?

ムチン様の粘液質でも分泌しているのでしょうか。。

ちなみに培地は、
自家製のRPMI1640(P/S+)に
FBS 20 %, endothelial cell growth supplement (ECGS) 75 ug/ml, Heparin 5 IU/mlです。

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