C2C12筋管細胞のタンパク質抽出を行うにあたって、以下の点に困っております。アドバイスなどありましたら、ぜひ教えていただきたいです。
・C2C12細胞の分化3日目あたりで分化した細胞が密集して隙間が見えてくる。
・サンプル処理後(溶媒はメタノール、終濃度は0.01%以下)、4時間ほどで細胞が剥がれて隙間が目立つ。
実験の流れは次のとおりです。
C2C12細胞を60mm dishに 5×10^5 cells播種したあと、分化して4〜5日後(筋管の形成確認後)にサンプルを24時間処理(5mlに50μl)しています。サンプルは毒性のない濃度で調製しており、dishを揺らしながら添加しています。 |
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