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肺凍結切片のOCT包埋
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No.12085-TOPIC - 2024/01/17 (水) 09:16:43 -
ポスドク
マウスの肺組織を用いて凍結切片を作製しようと考えております。
PFAで固定したのち、スクロースで置換後、OCTコンパウンドで包埋したいのですが、いくら調べても「OCTで包埋」としか出てきません。
ただモールド内でOCTコンパウンドに肺組織を沈めれば組織内にOCTがいきわたるのでしょうか?肺内にOCTがいきわたらないように思うのですが、何か他の方法で注入しているのでしょうか?
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(無題)
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No.12085-6 - 2024/01/21 (日) 16:00:05 - 通りすがり
病理学のラボに出入りしていたのですが、
そこでは肺に直接針を刺してOCTコンパウンドを注入して膨らませていました。
組織が壊れるんじゃないかと思ったのですが、そういう方法もあるようです。
(無題)
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No.12085-5 - 2024/01/18 (木) 11:41:17 -
ポスドク
>固定液やスクロースとは異なって、Octは完全にはすみずみまで行き渡っている必要はないと思っています。
そうなのですね。てっきりパラフィンのように内腔全体に充填されていないと切り出した時にぼろぼろになるのかと思っていました。
(無題)
削除/引用
No.12085-4 - 2024/01/17 (水) 19:30:45 - あの
肺の研究はしたことがありませんが、他の内腔がある臓器での経験からは、
固定液やスクロースとは異なって、Octは完全にはすみずみまで行き渡っている必要はない
と思っています。
とりあえず、凍結切片つくってみて、染色、観察してみたらいかがでしょうか?
(無題)
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No.12085-3 - 2024/01/17 (水) 15:26:20 -
ポスドク
レスポンスありがとうございました。
肺胞腔内へのOCTの浸透が気になっております。
固定液(PFA)についてはシリンジにて注入していますので、OCTもそれに倣った方がいいのかと思っておりました。
沈めただけで、肺胞腔内にも十分浸透するものなのですか?
(無題)
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No.12085-2 - 2024/01/17 (水) 09:56:26 - み
OCTに組織を沈めて直ぐに冷凍で問題ないです。
肺胞腔内へのOCTの浸透を気にされているのでしょうか。
沈めてから少し静置して浸透するのを待って冷凍する人もしるかもしれませんね。
肺凍結切片のOCT包埋
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No.12085-1 - 2024/01/17 (水) 09:16:43 -
ポスドク
マウスの肺組織を用いて凍結切片を作製しようと考えております。
PFAで固定したのち、スクロースで置換後、OCTコンパウンドで包埋したいのですが、いくら調べても「OCTで包埋」としか出てきません。
ただモールド内でOCTコンパウンドに肺組織を沈めれば組織内にOCTがいきわたるのでしょうか?肺内にOCTがいきわたらないように思うのですが、何か他の方法で注入しているのでしょうか?
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