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(無題) 削除/引用 No.12077-17 - 2024/01/21 (日) 18:17:47 - あの その話で思い出しましたが、室温数時間の第二抗体反応なら次でもできるらしいです 以下、作業手順ですが、物理的には下から上の順番になります。 机上にサランラップを敷く 抗体液をのせる タンパクがついている側を下になるように、メンブレンを乗せる 横に濡らしたティッシュを置く 乾燥防止のためにメンブレン上にバッファ垂らす タッパウェアなどを逆さまにして蓋をする

(無題) 削除/引用 No.12077-16 - 2024/01/21 (日) 15:53:29 - 通りすがり ハイブリバッグの話でなはないのでご不要かもしれませんが、 パラフィルムと角形培養dishで代用できますよ。 角形培養dishを天地逆にして、蓋側にパラフィルムを張り、 そこに数百uL抗体溶液を垂らし、その上にメンブレンを置き、 最後に蓋（天地逆にしているので、皿側）に濡らしたキムワイプを張り付けて 湿箱にします。 これで4 oC, o/nで反応させるなど、愛用しています。 コストもパラフィルムを張り替えるだけですのでほとんどかかりません。 いい感じの大きさの角形培養dishが手元にあればよいですが、 なければ試供品を出してもらえばずっと使いまわしできます。

(無題) 削除/引用 No.12077-15 - 2024/01/18 (木) 08:54:08 - あの もし四辺をシールする気になるなら　筒状の商品にこだわる必要も無いですね

(無題) 削除/引用 No.12077-14 - 2024/01/18 (木) 08:30:18 - たこ ああ、あと欠品やら何やらでにっちもさっちも行かなかったときは、ジップロック使ってました。 蛇足ですが。

(無題) 削除/引用 No.12077-13 - 2024/01/18 (木) 08:15:01 - あの ウエスタンブロットに使うなら　DNAseフリーである必要はないから、 食品の真空パック用のプラスチック製品で代替できないかな。 試したことないけど、アマゾンのB08RJ9BZPT　とか。

(無題) 削除/引用 No.12077-12 - 2024/01/18 (木) 02:49:36 - LPS 昔のラボにあったのはこれですが、結構な値段ですねえ。 クリアファイルをシールして使ったりもしてましたけど、抗体の時は、温度も上げなくていいので

(無題) 削除/引用 No.12077-11 - 2024/01/18 (木) 01:29:20 - たこ >[Re:10] おおさんは書きました : > USのラボにあったやつは確かなんか食材を保存するとかそんな感じの箱の中に入っていたので、ハイブリ専用に作られているのではないようにおもえる。 先に挙げたものも、さらに前、学生の時に使用していた同様の品もハイブリ専用とされているものではありませんでしたが、少なくともWBに使用する限りで問題はなかったです。 抗体の再利用に関しても特に問題を感じたことはなかったです。 あくまで私の経験＆旧所属の使用感であって、あまり何も考えず使用していたので別の問題がある可能性は否定できないですが・・・

(無題) 削除/引用 No.12077-10 - 2024/01/17 (水) 12:51:15 - おお >[Re:9] たこさんは書きました : > 日本にいるときはこれを使っていました。 > https://www.monotaro.com/p/6432/8076/ > Home DepotやLowe'sで聞いてみたらいいかもしれないですね。 > ちょっと聞きにいってみようかな。 USのラボにあったやつは確かなんか食材を保存するとかそんな感じの箱の中に入っていたので、ハイブリ専用に作られているのではないようにおもえる。

(無題) 削除/引用 No.12077-9 - 2024/01/17 (水) 02:17:47 - たこ 日本にいるときはこれを使っていました。 https://www.monotaro.com/p/6432/8076/ Home DepotやLowe'sで聞いてみたらいいかもしれないですね。 ちょっと聞きにいってみようかな。

(無題) 削除/引用 No.12077-7 - 2024/01/13 (土) 10:43:15 - あの 直接の回答ではありませんが、北米でも購入できそうな次を導入すると https://www.toyobousa.com/lifescience-can-get-signal.html 抗体濃度を、さらに100倍以上希釈できて、バックグラウンドも減らせます。 上記の導入コストは増えるけれども、抗体のコストを減らせるので、当方は気にいっています。

(無題) 削除/引用 No.12077-6 - 2024/01/13 (土) 10:02:49 - あの 最後の、在米というのを読み落としていました。

(無題) 削除/引用 No.12077-5 - 2024/01/13 (土) 09:43:50 - おお axel.as-1.co.jp/asone/d/63-6686-54/ As-Oneが売ってそうですね。チューブ状になったやつもあるようで、以下は海外のメーカーでしょうか。。。 www.uline.com/Product/Detail/S-3503/Bags-on-a-Roll/4-x-6-4-Mil-Bags-on-a-Roll?pricode=WB0354&gadtype=pla&id=S-3503&gad_source=1&gclid=CjwKCAiA44OtBhAOEiwAj4gpOUPY00HNL9D0JzEo9whjIciC2t4eO7WP8RHW1lnXBrj6nZO7pB4p7RoCNngQAvD_BwE

(無題) 削除/引用 No.12077-4 - 2024/01/13 (土) 09:17:01 - ハイブリ おおさん、ありがとうございます。 調べて見つかったうち一つがcosmobiousaさんのものなんですが、（hを抜いても）なぜかリンクを貼り付けられなかった。本文でないところならいけるか？ ttps://www.cosmobiousa.com/categories/nucleic-acid-engineering/hybridization バッグは見つかるんですが、ロールが見つけられずにいます。まあ、本文に書いた実験だけならロールで無くバッグで十分に目的を達成できるのではありますが……。

(無題) 削除/引用 No.12077-3 - 2024/01/13 (土) 08:48:32 - おお www.fishersci.com/shop/products/whatman-sealable-hybridization-bags/09927752#?keyword=hybridization%20bag www.fishersci.com/shop/products/heat-sealable-poly-bag-15x20cm/50212872#?keyword=hybridization%20bag やすいか高いかはおいておいて売っているには売ってます。素材は厚手のPolyethyleneでアマゾンとかでも見つかりそうですけど、、、 代替えあんとしてはプラスチックの箱に膜をおいて、上から抗体をかけて、更に上からパラフィルムでカバーして乾燥しないようにするというのもありかと思います。

(無題) 削除/引用 No.12077-2 - 2024/01/13 (土) 08:43:21 - あの 使っていますよ それから Googleで　ハイブリダイゼーション　バッグ で色々　見つかりますよ。 DNA用を流用です。

ハイブリバッグ 削除/引用 No.12077-1 - 2024/01/13 (土) 07:59:12 - ハイブリ ハイブリバッグの安いものを探しております。皆さまのラボで使っているものを、カタログナンバーと共に紹介して頂けませんか？バッグではなくロールでも結構です、というかそっちの方が基本安いので好みなのですが、ネット上で上手く情報を見つけられませんでした。 使用用途は、ウェスタンブロットでメンブレンに抗体をつけることです。普段は抗体をつけるのに、メンブレン（8x7.5cm位のサイズ）が丸々入るプラスチックの箱に抗体液10mlを加えてrocking shakerに4度で一晩おく方法を取っています。しかし、今回使う抗体は非常に少ない量しか手に入らない為、出来る限り少量で抗体付けをする為の工夫をしようと思っています。そこで、ハイブリバッグの使用を考えています。 15年以上前は、上記と同じサイズのメンブレンと0.5 - 1ml程度の抗体液をハイブリバッグに一緒に入れて空気をほぼ完全に抜いた後にシールして、それをガラスプレート2枚で挟み込んでクリップでとめたものを4Cに一晩おくという方法を取っていました（実験医学かなにかの雑誌で紹介されていた方法だったと思います）。今回この方法を試そうとハイブリバッグを探したのですが、周りのラボでは使ってるところは皆無でした。そして、探し方が悪いのか、ネットで探してもあまり情報が集まらず、ロールに関しては見つけられませんでした もしかしたら今時ハイブリバッグ使ってるラボって絶滅危惧種だったりするのか？と思い始めています。当方在米です。よろしくお願いいたします。

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