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インターナルコントロールよう抗体、HRP Conjugate トピック削除
No.12074-TOPIC - 2024/01/11 (木) 07:00:41 - おお
WBでアクチンなどインターナルコントロールよう抗体は感度もそんなに必要でなく、ほぼ毎回使うならHRP Conjugateされたものを買っておけば二次抗体のステップがいらないので手間が省けると思ってますが、HRPが4度で数ヶ月とかでグリセロール入でー20度でどれくらい持ちますかねぇって感じです(まあ一年は持ちそうな気がしますが)。

実際に使われている方、使ったことがある方、いますでしょうか。もしそうならご経験など教えてください。
 
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No.12074-10 - 2024/01/17 (水) 04:39:20 - おお
>[Re:9] Kさんは書きました :
> おおさん、私はBioLegendのものを使っています。

ありがとうございました。参考になります。

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No.12074-9 - 2024/01/15 (月) 10:09:56 - K
おおさん、私はBioLegendのものを使っています。推測ですがcarrier proein, preservativeの有力候補はBSAとProclineでしょうね。Preservativesと複数形なのでまだあるのでしょうが・・・。経験的に抗体の4℃での長期保存には防腐剤は必須と実感しております(厳密な無菌ハンドリングをしている場合を除く)。ちなみに、TDSにThe antibody solution should be stored undiluted between 2°C and 8°C, and protected from prolonged exposure to light. Do not freeze.とあり、怖くてグリセロール凍結は試したことないですね。

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No.12074-8 - 2024/01/15 (月) 08:29:46 - おお
皆さんありがとうございました。二次抗体のHRP、結構持つもんなんですね。こっちのラボはJackson ImmunoResearchの凍結乾燥品です。いまホームページをみると水で戻したあと4度で6ヶ月は大丈夫と書いてますが、経験上それくらいかそれより短い期間でヘタってます。なのでグリセロールを入れてー20で保存しています。それなら1年以上は持っています。

皆さんの二次抗体は長期持っているようなのでできればどの商品か教えていただければと思ってます。


何でしょうね。。。精製の度合いとか安定化になにか使っているとか、Conjugateの微妙な違いとか、そういう違いがあるんでしょうか。。。

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No.12074-7 - 2024/01/13 (土) 20:39:14 - K
私は10年間同じバイアル・4℃保存のgoat anti-mouse IgG-HRPとgoat anti-rat IgG-HRPを使っていて問題を感じていないですね。私の使用目的はELISAですが、会社のDTSのapplicationにはIHC, WBも入っています。Formulation: Aqueous buffered solution containing a carrier protein and preservatives.とありますので、使われている安定剤次第なのでしょうね。もちろん会社の使用期限はずっと短く自己責任での使用です。

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No.12074-6 - 2024/01/13 (土) 13:00:12 - あの
うちでは、冷蔵庫の中にタッパウェアを置いて、そこにHRP標識の第二抗体を保管しています。

使用の直前に取り出す、使用中はオンアイス、使用直後に保管のルールさえ守れば、
少なくとも3年は問題なく使えています。

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No.12074-5 - 2024/01/13 (土) 08:53:20 - おお
あ、たしかにそうですね。2次抗体なんかはー20とかでそう簡単に駄目になるもんでもないですね。
最近思うのですが、安定化されたHRPもあるようで今使っているSA-HRPは4度で保存するというメーカーのSuggestionがあるのですがまあ1年は持っている。2次抗体は4度だと3ヶ月ぐらいかなという感覚ですけど。

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No.12074-4 - 2024/01/12 (金) 19:14:56 - 774R
書き忘れたけどグリセロール入りで-30℃保存です。

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No.12074-3 - 2024/01/12 (金) 18:52:44 - 774R
通常使う2次抗体のHRPは数年単位で問題ないですけどね。うちのは5年以上経ってるけど感度不足はないですね。

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No.12074-2 - 2024/01/12 (金) 18:41:09 - toto
anti-actinAb-HRPなどではないですが、ナノボディーHRPであれば自家製のを4℃で置いてますが、相当安定です。2年以上おいてますが、全く活性の低下は感じません。

インターナルコントロールよう抗体、HRP Conjugate 削除/引用
No.12074-1 - 2024/01/11 (木) 07:00:41 - おお
WBでアクチンなどインターナルコントロールよう抗体は感度もそんなに必要でなく、ほぼ毎回使うならHRP Conjugateされたものを買っておけば二次抗体のステップがいらないので手間が省けると思ってますが、HRPが4度で数ヶ月とかでグリセロール入でー20度でどれくらい持ちますかねぇって感じです(まあ一年は持ちそうな気がしますが)。

実際に使われている方、使ったことがある方、いますでしょうか。もしそうならご経験など教えてください。

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