Bio Technical フォーラム

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遺伝子導入後のWB トピック削除
No.11997-TOPIC - 2023/12/11 (月) 11:35:51 - テグレトール
 ある遺伝子を強制発現するためレンチウイルスベクターを用いて細胞株に遺伝子導入しました。
 ウエスタンブロットで発現を確認したところ、細胞株によってバンドの出現する位置が微妙に異なっている(3〜5kDくらいの違い)のですが、このようなことはよく起こり得ることなのでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.11997-5 - 2023/12/12 (火) 10:28:02 - おお
>タグとエンドと両方見ていて、
両方で挙動が一致するならバンドの信頼度は高いですね。

>なぜ細胞によって違いが
different processing and/or modification among cell lines

(無題) 削除/引用
No.11997-4 - 2023/12/12 (火) 10:24:55 - 774R
翻訳後修飾があればその違い

(無題) 削除/引用
No.11997-3 - 2023/12/12 (火) 09:22:21 - テグレトール
 どうも有難う御座います。タグとエンドと両方見ていて、同じ位置にバンドが確認されるので、おそらく正しいものを見ていると思われます。なぜ細胞によって違いが生じるのでしょうか?
 

(無題) 削除/引用
No.11997-2 - 2023/12/11 (月) 17:03:39 - おお
あっても驚きませんが。
タグ付けてますか?それとも特異的抗体でエンドも見えてますか?

遺伝子導入後のWB 削除/引用
No.11997-1 - 2023/12/11 (月) 11:35:51 - テグレトール
 ある遺伝子を強制発現するためレンチウイルスベクターを用いて細胞株に遺伝子導入しました。
 ウエスタンブロットで発現を確認したところ、細胞株によってバンドの出現する位置が微妙に異なっている(3〜5kDくらいの違い)のですが、このようなことはよく起こり得ることなのでしょうか?

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