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4℃で保存の一次抗体 トピック削除
No.11996-TOPIC - 2023/12/10 (日) 17:51:28 - FEN
サンタクルズなどの一次抗体は4℃保存となっており、凍結不可などの注意事項が書いてありますが、1年経たずに抗体の活性が低下してしまう印象です。できればもっと長い期間使用できるように保存できたらと思っています。

抗体の値段も私に取っては非常に高いので、何か良いアドバイスを頂けると嬉しく思います。

よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.11996-11 - 2023/12/12 (火) 00:29:08 - たこ
凍結すなというものでも低級着チューブに分注して凍結保存してましたけどね。
それで問題なかったし。
グリセロール入れて-20℃保存もいいけど、totoさんのおっしゃるようにヘタるものもあるので全てにつかえるわけではないです(経験あり)。
どうしても4℃があかんのやったら、ごく少量ずつ凍結保存@、グリセロール含−20℃保存Aの抗体サンプル作成して、短期間保存(1週間くらい)後に4℃保存Bのものと比較して、使えるかどうか確認とかしてみてはいかがですか?
凍結orグリセロールで大丈夫ならそれで経験上数年はいけるはずですが。

(無題) 解決済み 削除/引用
No.11996-10 - 2023/12/11 (月) 20:58:18 - FEN
みなさん

ちょっと見ないうちにたくさんのアドバイスを頂き、本当にありがとうございます。4℃保存とはいえ、小分けして保存するのが良さそうな気がしました。
これまで雑な保存・使用だったんだと思います(コンタミの可能性とか)。

4℃でも何年も使えているというのを聞いて、今後もサンタクルズの抗体を安心して購入する気になれました。

ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.11996-9 - 2023/12/11 (月) 15:23:48 - bじ
抗体液;グリセロール=1;1よく混和、
−20〜−30℃ 保存
1年以上余裕

(無題) 削除/引用
No.11996-8 - 2023/12/11 (月) 10:52:29 - G25
多分、市販の抗体であれば保存液もそれなりに配慮されていると思うけど、
抗体濃度が低いために不安定なのであれば、BSAなどのキャリアタンパク質を十分な濃度で加えておくといいと思う。
チューブに分注して小分けすると各チューブごとに吸着ロスが生じるけど
キャリアを加えておくことで吸着ロスの低減にもなる。

(無題) 削除/引用
No.11996-7 - 2023/12/11 (月) 10:27:40 - 使えてます
4℃でサンタの30年前の抗体も使えてますが・・・・。

等量グリセロール加えて-30℃にしてる研究室もあると思います。

(無題) 削除/引用
No.11996-6 - 2023/12/11 (月) 09:41:27 - toto
サンタクルーズの抗体が1年くらいでへたるとすると、それはおそらく濃度が0.1mg/mLと薄いせいではないでしょうか。4度でも普通は安定です。何か生えない限りは。うちでは10年以上平気で4度保存で使ってる抗体もいくつもあります。20年ものも問題なく使えてます。ただ濃度がいずれも1mg/mL以上です。
グリセロールを等量加えて-20度保存するとさらに安心ではあり、やってたこともありますが、まれにグリセロール添加によって抗体が失活したことがあって、以来やってません。4度で到着した市販の抗体はそのまま(サンタクルーズの抗体のも含めて)、また、自分で作った抗体はProclin300を防腐剤として加えて、あとはトレハロースを5%加えて4度で1mg/mL以上にして保存してます。どこかのメーカーもトレハロースを安定化剤として加えていたので。自分では効果を調べてはいないですが。

(無題) 削除/引用
No.11996-5 - 2023/12/11 (月) 09:18:50 - G25
凍結保存すなというのは繰り返しのお凍結融解がよくないわけで、
小分けして冷凍保存、当面使う一本は解凍状態で冷蔵保存すればいい。
一度冷凍するだけで少しは力価が落ちるかもしれないけれど、あなたが長期冷蔵したときの力価低下ほどではないと思う。
あるいは、どこかのメーカーで凍結しないように50% glycerolを加えて-20~-30℃保存というのを推奨していたのを見た記憶がある。


まあ、イムノグロブリンなんて丈夫なタンパク質なので腐らせない限り冷蔵保存で長期間元気だと思うけど。使っているうちに微生物の汚染なんかがあったのかも。

(無題) 削除/引用
No.11996-4 - 2023/12/10 (日) 19:21:43 - おお
4度で5、6年以上持っているけどねぇ。

(無題) 削除/引用
No.11996-3 - 2023/12/10 (日) 19:02:28 - FEN
あのさん

早速有益な情報をありがとうございます。
グリセロールの割合まで教えて下さり大変助かりました。
早速試してみようと思います。

どうもありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.11996-2 - 2023/12/10 (日) 18:01:46 - あの
一般的なIgGなら分注して、一部を凍結保存しています。メーカーの指定は無視しています。

凍結融解が不安なら、グリセリンを同量添加して50%グリセリンにして、マイナス30度で保存する方法もあります。

4℃で保存の一次抗体 削除/引用
No.11996-1 - 2023/12/10 (日) 17:51:28 - FEN
サンタクルズなどの一次抗体は4℃保存となっており、凍結不可などの注意事項が書いてありますが、1年経たずに抗体の活性が低下してしまう印象です。できればもっと長い期間使用できるように保存できたらと思っています。

抗体の値段も私に取っては非常に高いので、何か良いアドバイスを頂けると嬉しく思います。

よろしくお願いします。

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