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(無題) 削除/引用 No.11991-5 - 2023/12/10 (日) 18:26:56 - TE > 自分が使いたい細胞ではウイルスゲノムが検出されない 感染細胞にウイルスゲノムがインテグレートされているから、検出されないなんであるのでしょうか？遠心して細胞を取り除いても、死細胞から放出されるDNA/RNAを測ってしまいそうに思います。死細胞からのRNAはすぐに分解され、DNAはDNAase処理すれば十分な差が出せるということでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.11991-4 - 2023/12/09 (土) 19:48:22 - toto 自分ではないですが、共同研究してた友達が苦労してました。彼の場合も、それ用の試薬セットなどなかったのでprimerを自分で作成して、ポジコンとしてpackaging細胞の時はポジティブになり、非感染細胞ではネガになるような条件を作って、そういう条件下では、自分が使いたい細胞ではウイルスゲノムが検出されない、ということを示したら、認められたと聞いてます。

(無題) 削除/引用 No.11991-3 - 2023/12/09 (土) 17:40:46 - MJ toto様ありがとうございます。 PCRでの検出でよいとされています。 何かキットのようなものはありますでしょうか？ toto様は同じような境遇に立ち会ったことはございますでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.11991-2 - 2023/12/09 (土) 11:04:27 - toto それは検出限界について具体的に聞く必要があります。ウイルスの力価なのか、培地中のウイルス分子に対する抗体、あるいはＰＣＲでの検出に寄るのか、その数値がいくら以下と、担当部署で規定されてるはずです。統一したものは無いので、各組織で定めることになってます。一般的に、製薬会社などでは大変厳しくなってます。 力価以外は具体的なプローブと感度についても定められているはずで、もしない場合には、ウイルス産生細胞との比較を一般的な抗体か、オリゴDNAで行って、この条件では検出できなかった、といえばいいことになります。

残存ウイルスの検出キットについて 削除/引用 No.11991-1 - 2023/12/09 (土) 10:40:58 - MJ お世話になります。 感染に用いたレンチウイルスの残存が検出限界以下ならば感染細胞をP1として扱えると事務方から言われております。 共同研究先にキットをお願いし、測定を行っていただき、クリアしたならば研究室に細胞を譲渡いただこうと思っています。 おすすめのキットがありましたらご教示いただけませんでしょうか？ 調べた限りでは見つけられませんでした。 キットがなければどのようなもので代用可能かお示ししていただけましたら幸甚です。 どうかよろしくお願いいたします。

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