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(無題) 削除/引用 No.11973-5 - 2023/12/05 (火) 05:10:13 - おお >[Re:4] あのさんは書きました : > 3)なおセルストレーナーのようなものだけで、細胞の種類を一種類だけにするのは、無理があるのでは？ 確かカルシウム濃度が（確か低く）調整されていて、ファイブロとか増殖しないようになっていたような気がする。詳しい人解説求む。

(無題) 削除/引用 No.11973-4 - 2023/12/05 (火) 03:47:49 - あの その実験をしたことはありませんが、次の３点が気になります。 1) ディスパーぜ処理の温度が低すぎないか？ 　　参考: https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/00527.html 2)アキュマックスよりも強いコラゲナーゼの方が良いのでは？ 3)なおセルストレーナーのようなものだけで、細胞の種類を一種類だけにするのは、無理があるのでは？ 密度勾配遠心とか、ウェアへの接着時間の違いを利用するとかが、初代培養でよく使われる手法です。

(無題) 削除/引用 No.11973-3 - 2023/12/05 (火) 03:05:34 - おお https://www.jove.com/v/56027/isolation-culture-primary-mouse-keratinocytes-from-neonatal-adult こっちは100 micron strainer と書いてある。

(無題) 削除/引用 No.11973-2 - 2023/12/05 (火) 03:03:33 - おお https://link.springer.com/protocol/10.1385/1-59259-185-X:139 色々と違うところがありますけど、上記の論文では70um nylon cell strainerを使ってますね。

新生仔マウスからのケラチノサイト単離について 削除/引用 No.11973-1 - 2023/12/04 (月) 20:30:08 - 初心者 ケラチノサイトを新生仔マウスから単離しているのですが、細胞数が少ないと感じます。1匹あたり2.0×10⁶cells程度回収できています。 方法は 生後1日から3日目 のC57BL/6Nマウスを氷中麻酔し、ハサミで腹側を切り開くようにして皮膚を単離 ↓ 消毒後、切り取った皮膚片をシャーレ中のディスパーゼ�U(2.5U/ml)を含むMCDB153培地に入れ16時間程度4℃で浸漬 ↓ ピンセットを使って真皮から表皮を剥がし、表皮片のみが入ったシャーレ中のAccumaxに浸漬。37℃で5分間インキュベート ↓ セルストレイナー(孔径40 µm)に通して50 mlチューブに組織片を取り除いたKCを集める のように行っています。

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