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Ponceau S染色で脱色しきらない トピック削除
No.11958-TOPIC - 2023/11/29 (水) 10:11:17 - mo
ビークル社のポンソーS染色液を使用して、説明書に従って利用していますが、
バックグラウンドが微妙に残るのと、バンド色味が薄いのが気になっています。

2-5分の染色
1%酢酸でのバックグラウンドの除去、2分程度→撮影
0.1MNaOHでの全体脱色
蒸留水での撮影
といったプロトコルです。


@バックグラウンドが多少残るのは通常のことなのでしょうか?解決策はありますでしょうか。
Aバンドのメリハリをはっきりさせる方法はありますか?
B他社製品でおすすめなものはありますか
 
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(無題) 削除/引用
No.11958-7 - 2023/11/29 (水) 11:26:48 - おお
0.1MNaOHは使ってませんね。蒸留水で脱色してます。バックがある程度以上きれいになるようになるまで。

(無題) 削除/引用
No.11958-6 - 2023/11/29 (水) 11:22:00 - mo
わかりにくくて申し訳ないです。
蒸留水で撮影が誤字で蒸留水で洗浄が訂正後です。

pvdf膜の転写後の一時的な染色です。

蒸留水やtbstで抜ける染色液もありますよね。
染色液の組成が違うらしいですが、どの組成でも蒸留水で抜けるのでしょうか。

脱色しすぎないというのは、参考になりました。

(無題) 削除/引用
No.11958-5 - 2023/11/29 (水) 10:51:41 - TS
あ、ちょっと勘違いでした。

ゲルの染色でしょうか。私が記載したのはPVDFの染色でした。
ゲルでしたら無視してください。

私のところではPVDFを染色後、蒸留水で2−3回洗っているだけです。
染色状況は先の投稿に書いた通りです。

(無題) 削除/引用
No.11958-4 - 2023/11/29 (水) 10:48:35 - TS
>蒸留水で撮影→洗浄です

うちもこれです。
むしろ、バックは少し残る程度がきれいに染色できるかなと思います。バンドのメリハリはは十分に維持できます。PonceauSは抜けやすいので、洗浄しすぎるとバンドも薄くなります。

(無題) 削除/引用
No.11958-3 - 2023/11/29 (水) 10:22:29 - mo
蒸留水で撮影→洗浄です

(無題) 削除/引用
No.11958-2 - 2023/11/29 (水) 10:20:09 - おお
光学系フィルターでコントラストつけることはできると思う。えっと赤をカットできれば良かったと思うんだけど。

Ponceau S染色で脱色しきらない 削除/引用
No.11958-1 - 2023/11/29 (水) 10:11:17 - mo
ビークル社のポンソーS染色液を使用して、説明書に従って利用していますが、
バックグラウンドが微妙に残るのと、バンド色味が薄いのが気になっています。

2-5分の染色
1%酢酸でのバックグラウンドの除去、2分程度→撮影
0.1MNaOHでの全体脱色
蒸留水での撮影
といったプロトコルです。


@バックグラウンドが多少残るのは通常のことなのでしょうか?解決策はありますでしょうか。
Aバンドのメリハリをはっきりさせる方法はありますか?
B他社製品でおすすめなものはありますか

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