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マウス細胞株と抗癌剤を使用した実験
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No.11910-TOPIC - 2023/11/10 (金) 15:36:45 -
ほーきんす
マウスの実験で
@細胞株をマウスに皮下移植
A1週間後に薬剤の定期投与開始。
B4週後に腫瘍摘出
C免疫組織化学染色で評価
の流れでしております。
腫瘍を摘出してHE染色すると腫瘍の中心がほとんど壊死しており、免疫組織化学染色で評価できそうな領域がかなり少ないです。
実際にCD8やFoxP3を染めてみても評価範囲がかなり少ないです。
文献通りの個数で皮下移植をしているのですが、何が問題なのでしょうか?
ちなみにコントロール群(薬剤未使用)でも中心が壊死しています。
よろしくお願いいたします。
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No.11910-7 - 2023/11/11 (土) 10:27:28 -
ほーきんす
ありがとうございます。
再度実験を行い、早めに摘出して免疫染色してみようと思います。
(無題)
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No.11910-6 - 2023/11/11 (土) 08:25:19 - たこ
文献と同じ細胞株を使っても、sub-line化されて増殖スピードが違うこともあるでしょうしね。
結局差が出てくるまでの間に免疫微小環境の変化は起きているのでしょうから、染色のendpointを必ずしも1か月とする必要はないと思います。
壊死で評価がまともにできないということならなおのこと。
私の経験ではありませんが、ラボメンバーで-500 mm^3以内くらいでやってる人がいた記憶があります。
(無題)
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No.11910-5 - 2023/11/10 (金) 22:24:20 -
ほーきんす
ありがとうございます。
コントロール群と薬剤投与群で抗腫瘍効果を比較する場合、約1か月投与しないと差が出ないため、1か月後の腫瘍で免疫染色するものだと思っておりました。
(無題)
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No.11910-4 - 2023/11/10 (金) 16:39:59 - おお
普通はある程度以上大きくなると中心部は壊死してくるものだと思ってます
(無題)
削除/引用
No.11910-3 - 2023/11/10 (金) 16:08:47 - あああ
増殖の早い細胞は血管の発達が間に合わず、腫瘍が大きくなると中心部は壊死します。
例えば2,000mm3とかだと大きすぎです。
小さいうちに300mm3とかのうちに回収して染色した方が良いと思います。
(無題)
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No.11910-2 - 2023/11/10 (金) 15:40:00 -
ほーきんす
1匹あたり5.0×10 5個 DMEM50μLで皮下移植しています。
マウス細胞株と抗癌剤を使用した実験
削除/引用
No.11910-1 - 2023/11/10 (金) 15:36:45 -
ほーきんす
マウスの実験で
@細胞株をマウスに皮下移植
A1週間後に薬剤の定期投与開始。
B4週後に腫瘍摘出
C免疫組織化学染色で評価
の流れでしております。
腫瘍を摘出してHE染色すると腫瘍の中心がほとんど壊死しており、免疫組織化学染色で評価できそうな領域がかなり少ないです。
実際にCD8やFoxP3を染めてみても評価範囲がかなり少ないです。
文献通りの個数で皮下移植をしているのですが、何が問題なのでしょうか?
ちなみにコントロール群(薬剤未使用)でも中心が壊死しています。
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