Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

細胞の蛋白抽出ni トピック削除
No.11879-TOPIC - 2023/10/27 (金) 12:23:21 - ほーきんす
ご存知の方がいらっしゃいましたらご教授ください。

10dishに培養させた細胞株から蛋白抽出しウエスタンブロットをしようと思っています。いつもその際PRO-PREPを使用しているのですが、こちらはプロテアーゼ阻害剤が入っています。私の実験ではリン酸化処理が必要なためプロテアーゼ/ホスファターゼ阻害剤で蛋白抽出した方がよいと言われました。
PRO-PREP以外(プロテアーゼ/ホスファターゼ阻害剤)で蛋白抽出をされている方はいらっしゃいますでしょうか?またプロトコールは違いますでしょうか。

よろしくお願いいたします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



4件 ( 1 〜 4 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.11879-4 - 2023/10/27 (金) 13:49:44 - G25
市販のフォスファターゼ阻害剤カクテル製品を使用するなら、その使用説明書に従うのが当然でしょう。

(無題) 削除/引用
No.11879-3 - 2023/10/27 (金) 12:51:38 - ほーきんす
ありがとうございます。PRO-PREPにどれくらいの量のホスファターゼ阻害剤を投与するのかは製品によるのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.11879-2 - 2023/10/27 (金) 12:40:07 - G25
今お使いの抽出系(PRO-PREP)に、自前のフォスファターゼ阻害剤を加えればいいだけじゃないの?

古典的にはNaFとかlevamisolとか。今じゃ、各社からプロテアーゼ阻害剤カクテルと同様、フォスファターゼ阻害剤カクテルも売ってる。

細胞の蛋白抽出ni 削除/引用
No.11879-1 - 2023/10/27 (金) 12:23:21 - ほーきんす
ご存知の方がいらっしゃいましたらご教授ください。

10dishに培養させた細胞株から蛋白抽出しウエスタンブロットをしようと思っています。いつもその際PRO-PREPを使用しているのですが、こちらはプロテアーゼ阻害剤が入っています。私の実験ではリン酸化処理が必要なためプロテアーゼ/ホスファターゼ阻害剤で蛋白抽出した方がよいと言われました。
PRO-PREP以外(プロテアーゼ/ホスファターゼ阻害剤)で蛋白抽出をされている方はいらっしゃいますでしょうか?またプロトコールは違いますでしょうか。

よろしくお願いいたします。

4件 ( 1 〜 4 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。