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(無題) 削除/引用 No.11876-3 - 2023/10/26 (木) 02:26:38 - U ありがとうございます。検討します。 Thioglycerol はbMEとほぼ同等の性質と還元能をもつbMEの代替品ということで、メーカーから、いい試薬がありますよと言って紹介されました。利点は匂いがbMEと比べあまり強くないことです（メルカプト臭はbMEの１/10くらいの感じです）。bMEから切り替えてるところも少しずつ増えていると聞きました。 DTTは速攻でかつ還元能はたいへん優れていますが、溶液に溶かした後の還元能があまり長持ちしないのと熱に弱いので、たまにプロテオミクス解析 するときにTrypsin による断片化の前処理のときしか使っていません。なので電気泳動でどうかはわかりません。

(無題) 削除/引用 No.11876-2 - 2023/10/26 (木) 01:47:27 - おお Thioglycerol特有の事象があるならそれはわかりませんが、一度還元剤なしで流してみると還元剤の効きによるものかわかるかもしれません。 還元剤なしで流すと、バンドが少しぼやけた感じになったり、場合によってはレーンのいろんなところにバンドが現れたりします。おそらく酸化によって他のタンパクがくっついたり（アーティファクトだったり生理的な状態だったり）、分子内のS-S結合（これもアーティファクトだったり生理的な状態だったり）により移動度が変化することが原因ではないかと思われます。よって目的のバンドがレーン上で分散したりしてバンドが弱く感じたりノンスぺしふぃっくが増えたりするような感覚になるのではないかと。 Thioglycerolは使ったことがないですが、臭いですか？ｂMEだとにおいを気にする人がいていまはDTTを使ってますが、どっちが使いやすいかなとか思いました。

還元剤が古い件 削除/引用 No.11876-1 - 2023/10/25 (水) 22:22:39 - U western blottingで、還元剤が古くなったりすると（購入してから６年経ちます。bMEではなくてThioglycerolを使ってます）、抗体との反応性が悪くなったり、非特異的シグナルとか出やすくなったりしますか？

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