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ウエスタンブロッティングでメンブレンの保存方法
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No.11875-TOPIC - 2023/10/24 (火) 17:19:57 -
かき氷
ウエスタンブロッティングで転写後、予定があるので別の日に一次抗体をつけたいのですが、転写後のメンブレンをブロッキングせずに1×TBS-Tに浸して4℃保存で問題ないでしょうか
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No.11875-8 - 2023/10/25 (水) 02:00:42 - おお
乾燥させて保存しています。一度乾燥するステップを踏みますので。PVDFでもNCでも。
あるいはPVPでブロッキングの状態でオーバーナイトか2、3日。
(無題)
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No.11875-7 - 2023/10/24 (火) 23:05:10 - たこ
タッパーにTBST漬け4℃でやっていましたが、1日以上置く場合は念の為azideをつっこんでいました。
ブロッキング液でオーバーナイト程度は問題ありませんでしたが、数日(土日月くらいだったかな?)漬けた場合にオーバーブロッキングでマスクされたのか、検出で微妙なことになった経験があります。
発現量が少ないタンパク質を見るときは気をつけたほうがいいかもしれません。
(無題)
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No.11875-6 - 2023/10/24 (火) 21:51:36 - hじおp
経験では1週間くらいならばタッパーにいれて水入れて沈めた状態で4度保存で問題ないです。数週間とかあまり長くなると反応性が下がることがありましたので、長期保存はしないほうがいいです。ハイブリバック にいれて水入れて密封して凍結してるは人いました。
(無題)
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No.11875-5 - 2023/10/24 (火) 21:40:11 - ema
他の方法と比較検証まではしてないですが、乾かして常温保存、 メタノールから始めるとしてました。
(無題)
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No.11875-4 - 2023/10/24 (火) 20:44:32 - 774R
1週間、ブロッキング液に漬けておいてもいいです。
(無題)
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No.11875-3 - 2023/10/24 (火) 17:58:22 - あ
TBSTでも水でも、1週間くらい大丈夫だと思います。
乾かしておいておくのも手だと思います。
(無題)
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No.11875-2 - 2023/10/24 (火) 17:24:09 -
かき氷
転写したメンブレンは1週間くらい保存しておきたいです
ウエスタンブロッティングでメンブレンの保存方法
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No.11875-1 - 2023/10/24 (火) 17:19:57 -
かき氷
ウエスタンブロッティングで転写後、予定があるので別の日に一次抗体をつけたいのですが、転写後のメンブレンをブロッキングせずに1×TBS-Tに浸して4℃保存で問題ないでしょうか
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