Bio Technical フォーラム

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薬剤選択後のクローニング トピック削除
No.11853-TOPIC - 2023/10/17 (火) 12:02:44 - ぽぽ
細胞培養を行っている、大学生です。

現在、KO細胞を作製しており、遺伝子が導入されていない細胞とされている細胞を分けるために、薬剤選択をしています。そのようにしてできた単一コロニーをクローニングリングによって、24 well plateに移し、培養していく予定です。


そこで質問なのですが、プレートに移した後の培地にも薬剤選択で用いた薬剤を添加するべきなのでしょうか。

有識者の方、教えていただけると幸いです。
　
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(無題) 削除/引用
No.11853-2 - 2023/10/17 (火) 12:19:38 - qq
経験者としては、クローンした細胞を、同濃度もしくは半濃度の薬剤を添加して増殖させています。
その後、ずっと薬剤を添加し続けるかという点に関しては、意見の分かれるところかもしれません。
私は薬剤半量でずっと継代していて、1，2か月に2継代を薬剤なしで継代しています。

薬剤選択後のクローニング 削除/引用
No.11853-1 - 2023/10/17 (火) 12:02:44 - ぽぽ
細胞培養を行っている、大学生です。

現在、KO細胞を作製しており、遺伝子が導入されていない細胞とされている細胞を分けるために、薬剤選択をしています。そのようにしてできた単一コロニーをクローニングリングによって、24 well plateに移し、培養していく予定です。


そこで質問なのですが、プレートに移した後の培地にも薬剤選択で用いた薬剤を添加するべきなのでしょうか。

有識者の方、教えていただけると幸いです。
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