Bio Technical フォーラム

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トランスふぇくしょん試薬 トピック削除
No.11850-TOPIC - 2023/10/14 (土) 01:36:29 - おお
皆さんリポフェクションなどのケミカルなトランスフェクションは何を愛用してますか?

うちのラボはHEKかニューロブラストーマがメインですが、リポフェクタミン2000が大量に残っているのでそれを使ってました。またiPSも使うことも方針としてあります。

今までの感触ではFuGENE(HD)とかもよさそうですが、新しいものが出てますね。FuGENE4K ですかね。
 
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No.11850-11 - 2023/10/18 (水) 12:10:57 - おお
>[Re:9] かなさんは書きました :
> Polyjetです。

ありがとうございます。Polyjetの一票入りました。

(無題) 削除/引用
No.11850-10 - 2023/10/18 (水) 12:08:55 - おお
>[Re:8] CHさんは書きました :
> PEImaxはpolyscience社から出てますが、10万円以上もするものでなくても十分ワークしています。
> 293TやCOS7にです。

ありがとうございます。polyscience社はPEI単品でも売ってましたよね。

(無題) 削除/引用
No.11850-9 - 2023/10/17 (火) 17:05:06 - かな
Polyjetです。

(無題) 削除/引用
No.11850-8 - 2023/10/17 (火) 12:45:28 - CH
PEImaxはpolyscience社から出てますが、10万円以上もするものでなくても十分ワークしています。
293TやCOS7にです。

(無題) 削除/引用
No.11850-7 - 2023/10/15 (日) 07:52:06 - おお
>[Re:4] TSさんは書きました :
> HEKやほか上皮系をよく使います。
> もともとLF3K、LTXあたりを使ってましたが、最近はSignaGENのPolyjetというのを愛用しています。これまでの細胞でLFよりも大体成績はいいです(GFP発現ベクターで蛍光観察)。
> 安いので小サイズで試されてもいいかもしれません。

SignaGENのPolyjetですか、見た感じなんかPEIでもないポリマーなんでしょうか。いまつかっているSH−SY5yにはちょっと物足りなそうですが、SH−SY5yはたいていの試薬で効率が低い傾向にありますね。実験的には使えるくらいは入るのかもしれません。ラボで常備するという点ではこれを持っていてもいいかもしれませんね。

ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.11850-6 - 2023/10/15 (日) 07:47:05 - おお
>[Re:3] 774Rさんは書きました :
> 293とN2Aをメインに使ってますが、Lipofectamine2000も3000も普通に使えますが、粉末から調整するPEIがほぼタダの価格だったので切り替えました。(現在はびっくりするくらい値上がりしたようですが)
> Lipofectamineに比べ、PEIは細胞毒性が少ない印象です。

ありがとうございました。PEIはポピュラーになってますね。私の環境ではPEIも293に対して少し毒性が出ています。昔のテクニシャン(といってもバイオの知識ほぼなし)が作ったストックを使ってますが、なんかつかみどころがない。PEIはもう少し突き詰めてもいいのかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.11850-5 - 2023/10/15 (日) 07:43:58 - おお
>[Re:2] ぱうさんは書きました :
> おおさん、いつもありがとうございます。
>
> 私のラボでは293Tメインですが、やはりPEImaxばかりです。
> COS7でもPEImaxはワークしますが、他の細胞ではあまりうまくいった試しがないですね。
>
> そんなどうにもうまくいかない細胞に、ダメもとでFuGENE4Kを試したところPEImaxでは0.1%程度だったものが、50-60%入るようになり、ViaFectでは60-80%ほど入りました。毒性も見られなかったです。
>
> トランスフェクションで悩まれてる方いらっしゃれば、Promegaさんはサンプル配ってると思いますので、試してみてはいかがでしょうか。目をひん剥くほどの効率の良さでした。

ありがとうございました。この質問を書き込んだ直後に注文しようかなぁとWebを見ているとサンプルがもらえることに気が付いたので、頼んでみました。PEI系は今やポピュラーになりましたね。感触として悪くはないのですが、どうもHEKで少し毒性が出てしまいます。毒性が少なくよく使っているという人もいるようですが。リポフェクタミン2000もちょっと油断すると毒性も見られている次第です。リポフェクタミン2000はSH−SY5yにはかなりうまくいっているように見えますが、リポフェクタミン2000で細胞間の比較しているものとか見るとほかに比べるとあまりよくないので、、、といろいろ試したくなっている次第です。

もともと昔厳しいボスがリン酸カルシウムしか使わせないというのがあったので、まあHEKとかにはよく入るのでたいていの実験ではその時はそれでよかったのですが。

(無題) 削除/引用
No.11850-4 - 2023/10/15 (日) 02:49:51 - TS
HEKやほか上皮系をよく使います。
もともとLF3K、LTXあたりを使ってましたが、最近はSignaGENのPolyjetというのを愛用しています。これまでの細胞でLFよりも大体成績はいいです(GFP発現ベクターで蛍光観察)。
安いので小サイズで試されてもいいかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.11850-3 - 2023/10/14 (土) 17:06:53 - 774R
293とN2Aをメインに使ってますが、Lipofectamine2000も3000も普通に使えますが、粉末から調整するPEIがほぼタダの価格だったので切り替えました。(現在はびっくりするくらい値上がりしたようですが)
Lipofectamineに比べ、PEIは細胞毒性が少ない印象です。

(無題) 削除/引用
No.11850-2 - 2023/10/14 (土) 14:00:21 - ぱう
おおさん、いつもありがとうございます。

私のラボでは293Tメインですが、やはりPEImaxばかりです。
COS7でもPEImaxはワークしますが、他の細胞ではあまりうまくいった試しがないですね。

そんなどうにもうまくいかない細胞に、ダメもとでFuGENE4Kを試したところPEImaxでは0.1%程度だったものが、50-60%入るようになり、ViaFectでは60-80%ほど入りました。毒性も見られなかったです。

トランスフェクションで悩まれてる方いらっしゃれば、Promegaさんはサンプル配ってると思いますので、試してみてはいかがでしょうか。目をひん剥くほどの効率の良さでした。

トランスふぇくしょん試薬 削除/引用
No.11850-1 - 2023/10/14 (土) 01:36:29 - おお
皆さんリポフェクションなどのケミカルなトランスフェクションは何を愛用してますか?

うちのラボはHEKかニューロブラストーマがメインですが、リポフェクタミン2000が大量に残っているのでそれを使ってました。またiPSも使うことも方針としてあります。

今までの感触ではFuGENE(HD)とかもよさそうですが、新しいものが出てますね。FuGENE4K ですかね。

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