Caco-2細胞に刺激を行いTEERを測定しています。
文献を参考に、細胞に刺激を行っているのですが、TEERが変化しません。
何か解決方法や実験における問題点等がございましたらお教えいただけますと幸いです。
詳細は以下の通りです。
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（トランズウェルでの培養）
・播種時の細胞数：9.0*10^4 cells/cm2
・2日ごとに培地交換
・TEERはTranswellに播種後、15日ほどでで一定になります（800Ω/cm2程度）。
（以前のトピックNo.2934-TOPICでmonolayer様が尋ねられてたように、単層ではなく、一部重なって増殖しているように見えます。）
（これまでに試した刺激）
・無血清DMEMに置き換え1時間プレインキュベート
a) TNF-α と IFN-γをbasal側に添加 (終濃度50 ng/ml)
b) LPS を basal側に添加(終濃度100 µg/ml)
c) a+b
・a-cは0,1, 2, 8, 12, 24, 48時間で測定しましたがTEERの変化が認められません。
※刺激時のmediumについては、5mM HEPES/HBSSでも試してみましたが、HBSSに変えると、刺激の有無に関わらず、TEERが12時間ほどかけて上昇する（800から1200Ω/cm2）という現象が2回繰り返しで生じたため、現在は無血清DMEMで現在は試しています。
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