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(無題) 削除/引用 No.1184-3 - 2012/11/28 (水) 16:28:30 - ミトコン ＞名無しさん コメント、ありがとうございます。 やはりそのぐらいの感じですよね。 さらに論文を探したらKCNを加えていないものもいくつかありました。 ということで入れなくても大丈夫そうです。

(無題) 削除/引用 No.1184-2 - 2012/11/27 (火) 11:09:11 - 名無し 酵素活性をキノールで見ているならキノール酸化酵素をKCNで止める必要があるかどうかということでしょうか。あとはアンチマイシンの保険とか？

ミトコンドリア複合体I活性測定でのKCN添加の必要性 削除/引用 No.1184-1 - 2012/11/26 (月) 11:10:43 - ミトコン 現在、ミトコンドリア複合体Iの酵素活性測定系を立ちあえげています。 方法は、反応バッファーにミトコンドリア、アンチマイシン、シアン化カリウム、CoenzymeQ1を加えて34℃で10分ほど置き、その後NADHを添加してその酸化反応を吸光度を用いて測定し、ロテノン添加・非添加間での差を複合体Iの特異的な活性として算出しています。 多くの論文で用いている方法と同じだと思います。 ただ、シアン化カリウムはできるだけ使いたくないので、アンチマイシンのみの添加でデータを取ってみましたが、シアン化カリウムを入れても入れなくてもデータに大きな差がないことが分かりました。 確かにユビキノンの再酸化を抑えるのならば、複合体IIIの阻害剤であるアンチマイシンだけでも十分だと思うのですが。 そこで、質問ですが、シアン化カリウムを加える目的は複合体IVを阻害してユビキノンの再酸化を抑える以外に他に何かありますでしょうか？ よろしくお願い致します。

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