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レンチウイルスを用いた間葉系幹細胞(MSC)への遺伝子過剰発現 トピック削除
No.11827-TOPIC - 2023/10/05 (木) 14:43:26 - ozaki
間葉系幹細胞(MSC)への過剰発現を試みています。レンチウイルスを用いて過剰発現を試みているのですが、十分な遺伝子発現を誘導させることができずに困っています。GFPの過剰発現をさせても今一つGFPの蛍光を検出する事ができません。レンチウイルスのタイターに問題があるのかもしれませんが、ニューロンの初代培養細胞など他の細胞にはかなりの感染効率を発揮できております。何かコツや他のウイルスベクターも含めてアドバイスいただけないでしょうか??
 
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(無題) 削除/引用
No.11827-2 - 2023/10/05 (木) 16:19:17 - おお
最適ないMOIはさいぼうによってちがうので、ウイルス量を上げてみたらどう。


https://www.genecopoeia.com/resource/lentivirus-thats-my-moi-and-im-sticking-to-it-lentivirus-moi-cell-lines/


MSCs were transduced for 1 h or 16 h (overnight) at an MOI of 40 and 80.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2996877/

レンチウイルスを用いた間葉系幹細胞(MSC)への遺伝子過剰発現 削除/引用
No.11827-1 - 2023/10/05 (木) 14:43:26 - ozaki
間葉系幹細胞(MSC)への過剰発現を試みています。レンチウイルスを用いて過剰発現を試みているのですが、十分な遺伝子発現を誘導させることができずに困っています。GFPの過剰発現をさせても今一つGFPの蛍光を検出する事ができません。レンチウイルスのタイターに問題があるのかもしれませんが、ニューロンの初代培養細胞など他の細胞にはかなりの感染効率を発揮できております。何かコツや他のウイルスベクターも含めてアドバイスいただけないでしょうか??

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