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(無題) 削除/引用 No.11790-8 - 2023/09/21 (木) 13:15:11 - Skeptics 試験？演習問題？

(無題) 削除/引用 No.11790-7 - 2023/09/21 (木) 12:42:56 - さ 大昔から知られているものに、血清病というのがあります。

(無題) 削除/引用 No.11790-6 - 2023/09/21 (木) 10:13:27 - おお 異種のものが体に入ったらどうなるんだね。

ありがとうございます！ 削除/引用 No.11790-5 - 2023/09/21 (木) 09:36:00 - PBS RNA、タンパク質について理解しました。 動物についてはいかがでしょうか。 血清が入っていると腎臓に負担がかかるなどでしょうか？ 抗体、成長因子などの問題もあるのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.11790-4 - 2023/09/20 (水) 23:32:56 - FBS タンパク質について。10%FBSで培養してた細胞をPBSでのウォッシュあり無しで実験したことがある。ウォッシュ無しでは血清由来であろうnon-specific bandが強く（かつ多く）出て、ちょっと解析する気にならない結果になったっけ。見たいタンパクの発現量が弱くて、露光時間を長めにとってた時の話。 吸い切れてなかったからかな？と思って、10cmディッシュでまず2mlピペットで吸った後にディッシュを傾けたまま15秒程度放置して、下側に溜まってきた液をイエローチップを先につけたピペットで完全に吸い切って、という工程を加えてやってみたが、それでもnon-specific bandは残ってたな。 この時下側に溜まってくる液って量で言えば500ul近い時もあって、無視できない量なんだなと気付いた。実際、Starvationに弱い細胞を無血清で培養する時、このステップを入れるのと入れないので細胞の生存率が全然違うことがある（入れないと、24時間経っても殆ど死なない。入れると4時間くらいで浮き始めて、24時間で3-7割死んでる）。 ついでに、ウォッシュの回数を変えてもやってみた（0、1、2、3回）ことがあるけど、結果は1回洗えば十分、それ以上洗っても特に変わらない、だったな。以来、とりあえず1回は洗うことにしている。

(無題) 削除/引用 No.11790-3 - 2023/09/20 (水) 17:24:03 - あqwせdrftgyh 培地に含まれている血清を除去するためと思います。血清のタンパク質濃度はとても高く、組成も複雑なので、残存していると、その後の分析（特にタンパク質の分析の場合）に影響することがあるので。かならずしもPBSが最適とは限らないし、PBSでなくても良いとは思いますが、細胞にたいして毒性のないもの、そういう濃度であることは必要です。できるだけ細胞に影響を与えないようにするならば３７度で加温した無血清培地であらうのがよいとおもいます。

(無題) 削除/引用 No.11790-2 - 2023/09/20 (水) 17:04:22 - おお RNAはほとんど意味ないです。 その他についてのキーワードは血清。 タンパクの場合は洗わない方が良い場合もあります。

PBS washの意味 削除/引用 No.11790-1 - 2023/09/20 (水) 16:22:48 - PBS 培養細胞からのRNA抽出、タンパク質抽出、動物への移植の前段階でPBS washをする意味をそれぞれご教示いただけないでしょうか。

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