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(無題) 削除/引用 No.11733-12 - 2023/08/24 (木) 16:01:38 - AA 3−4週齢の卵胞発育の第一波に合わせて過排卵をかけることで卵子を採取することができます。それを通常の精子と人工授精することで、通常の性成熟で8週齢以上まってから交配を開始する場合と比べて1ヶ月程度早めることができます。 もちろん自然交配と違ってお金はかかりますが、通常の過排卵処理からのIVFと作業的には変わりませんのどの動物施設でも対応してくれると思います。 オスの若齢を使う場合は顕微授精だったりが必要になるので難しくなります。

(無題) 削除/引用 No.11733-11 - 2023/08/24 (木) 15:13:33 - か 過去にスレッドにあったと思うけど、５週齢とかで精子卵子を取り出して人工授精させて、仮母親に移植。 自然交配だと８−９週齢まで待たないといけないけど、１ヶ月くらい早くなる。 自分の施設でできないと外注だから、お金かかるよ。

(無題) 削除/引用 No.11733-10 - 2023/08/24 (木) 14:57:36 - CED 人工授精でスピードアップというのはどういう手法でしょうか。 半分に短縮することも可能でしょうか。

(無題) 削除/引用 No.11733-9 - 2023/08/24 (木) 13:23:34 - あああ 雌雄と週齢揃えて１５匹、という意味と想像しますけどそうなのか、１５匹は１回きりで良いのか、予算が十分あるのか、それとも自然交配でやりたいのか、情報と条件を書かないと。

(無題) 削除/引用 No.11733-8 - 2023/08/24 (木) 13:19:18 - CDE 人工授精などでスピードアップ

(無題) 削除/引用 No.11733-7 - 2023/08/24 (木) 12:49:39 - AA 妊娠3週間＋性成熟2ヶ月で1世代約3ヶ月とすると4世代で1年、そこから必要な数の個体を揃えて実験となると2年以上掛かる可能性も十分あるので、学生さんのプロジェクトなどで時間的制約があるならどこかの世代で人工授精などでスピードアップを図ったほうが良いかもしれませんね。

(無題) 削除/引用 No.11733-6 - 2023/08/24 (木) 11:53:44 - AA floxなら少なくともCre(-)なら野生型と同じはずなので、片親は全部ホモにできます。理想的には4重floxホモと4重cKOをかけ合わせれば確率1/2です。 遺伝子ABCD＋Creとして 1世代 遺伝子ABホモと遺伝子CDホモをかけあわせて4重ヘテロを作成。(確率1) 遺伝子ABorCDホモの個体とCre個体を交配し2遺伝子ヘテロ＋Creの個体を作成(確率1/2) 2世代 4重ヘテロをABホモ/CDホモと交配してABホモCDヘテロ/ABヘテロCDホモの個体を作製　(確率1/16) 4重ヘテロと2遺伝子ヘテロ＋Creの交配で、4重ヘテロ以上＋Creを作成(確率9/128) 3世代 ABホモCDヘテロ/ABヘテロCDホモの個体を交配し4重ホモを作る（確率1/16） 4重ヘテロ以上＋CreとABホモCDヘテロ/ABヘテロCDホモを交配して4重cKOを作る(確率1/128〜1/512) 4世代 4重ホモと4重ヘテロ以上＋Creで交配する　(確率 1/2〜1/32)

(無題) 削除/引用 No.11733-5 - 2023/08/24 (木) 11:15:15 - CED ごめんなさい。Floxです。 質問しているからには、最短を目指しています。 ここまでダブルFloxマウスを2種類用意するところまでは来ました。ここから、Creとこの2種類のFloxを掛け合わせていくことになります。 数は、15匹は欲しいところです。

(無題) 削除/引用 No.11733-4 - 2023/08/24 (木) 10:15:38 - AA ・ホモ接合にして致死や不妊ではない遺伝子については両親/片親をホモにしてしまう。 ・とにかくたくさん交配する ・ゲノム編集で野生型胚で4遺伝子KOを行う 一昔前は連鎖した遺伝子の二重欠損のためにとにかく乗換が起きるまで交配し続けるなんてこともありました。

(無題) 削除/引用 No.11733-3 - 2023/08/24 (木) 09:38:55 - あああ どの位の期間に何匹必要かを書かないと、計画立てられないと思いますが。

(無題) 削除/引用 No.11733-2 - 2023/08/24 (木) 07:09:19 - おお -/-で維持できるものはありますか？ すべてKOしたマウスは何と比べる予定ですか？

4つのローカスをホモにする必要があるKOマウスの作成方法 削除/引用 No.11733-1 - 2023/08/24 (木) 04:19:13 - CED 深夜に失礼します。 4つのローカスをホモにする必要があるKOマウスの作成を行う予定です。 掛け合わせ戦略としてどのようなものが考えられるのでしょうか。 最後の段階で+/-, +/-, +/-, +/-のヘテロとヘテロを組み合わせると極めて低い確率でしかホモができません。 １つか２つ無駄なステップを挟むにしても、作成するための戦略がいく通りも考えられる気がします。

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