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Proximity ligation assay (PLA)
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No.11668-TOPIC - 2023/07/29 (土) 05:41:59 - おお
Proximity ligation assay (PLA)
という免染(組織染色)で調べているタンパク同士が近接している(結合している)ときシグナルが見れる方法がありますが、どの程度普及しているのかなぁと思いました。
よく使っているとか、自身の研究分野の論文でよく見るとか、雑談程度で情報がくみ上げられたらなと思ってます。
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No.11668-7 - 2023/07/31 (月) 08:34:11 - おお
>[Re:4] Skepticさんは書きました :
> >[Re:3] 経験者さんは書きました :
> > ビオチン化酵素を使うやつですよね。
>
> 違います。
ビオチンを使うやり方で、組織染色で数十nm範囲の局在(結合していてもおかしくない距離)を見る方法があるのでしょうか?
(無題)
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No.11668-6 - 2023/07/30 (日) 07:22:13 - おお
>[Re:4] Skepticさんは書きました :
> >[Re:3] 経験者さんは書きました :
> > ビオチン化酵素を使うやつですよね。
>
> 違います。
>
> これ
>
https://www.abcam.co.jp/content/plaproximity-ligation-assay
>
アブカムもやってたんですね。
私がみた商品はSigmaのものです。
https://www.sigmaaldrich.com/US/en/products/protein-biology/duolink-proximity-ligation-assay
(無題)
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No.11668-5 - 2023/07/30 (日) 02:04:54 - あの
使ったことありませんが、面白そうですね。
お示しになったリンク先から行けるリンク先は、自分で第一抗体を標識するキットですが、
標識済みの第二抗体のペアの市販品を御存じだったら教えてください。
(無題)
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No.11668-4 - 2023/07/29 (土) 18:04:32 - Skeptic
>[Re:3] 経験者さんは書きました :
> ビオチン化酵素を使うやつですよね。
違います。
これ
https://www.abcam.co.jp/content/plaproximity-ligation-assay
(無題)
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No.11668-3 - 2023/07/29 (土) 15:06:49 - 経験者
ビオチン化酵素を使うやつですよね。私もやってましたし結構やられてますよ。免疫沈降で取れるやつも取れるし、近接しているタンパクも取れます。
この実験のキモは、正しいネガコンを置くことです。ビオチンを添加しなくても結構ビオチン化してしまいバックが高くなります。
(無題)
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No.11668-2 - 2023/07/29 (土) 11:32:52 - mp
結構使われている印象です。DNA修復関連の論文などでもよく見かけます。私自身は内在性蛋白のユビキチン化などをこれで検出できないかと思っているのですが、調べた限りほとんど論文は見当たりません。SUMO化に関してはいくつかあるようです。
Proximity ligation assay (PLA)
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No.11668-1 - 2023/07/29 (土) 05:41:59 - おお
Proximity ligation assay (PLA)
という免染(組織染色)で調べているタンパク同士が近接している(結合している)ときシグナルが見れる方法がありますが、どの程度普及しているのかなぁと思いました。
よく使っているとか、自身の研究分野の論文でよく見るとか、雑談程度で情報がくみ上げられたらなと思ってます。
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