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(無題) 削除/引用 No.11579-5 - 2023/07/03 (月) 13:04:22 - ossi H2O2でブリーチできるらしいです。 https://doi.org/10.1038/ncomms9390

(無題) 削除/引用 No.11579-4 - 2023/07/03 (月) 12:22:31 - toto やったことはないですが、おそらく、普通にAlexa488のついた2次抗体で免染して、観察するときに、pHを5くらいに下げてやると、GFPの蛍光だけ消えてAlxa488の蛍光だけ残るはずです。Alexa488のpKa値は正確には知りませんが、少なくともpH5より大分下のほうです。

(無題) 削除/引用 No.11579-3 - 2023/07/03 (月) 12:13:50 - ぱん PFAでは消失しないのですね。 透過処理にアセトンメタノールを使用しても難しいでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.11579-2 - 2023/07/03 (月) 11:52:38 - あああ PFA固定ではGFPは消失しません。 普通に考えてGFP発現細胞をA488染色するのは無理ですので、GFPを発現してない親株を手に入れるべきですが、どうしてもの場合は、488励起光をずっと当てて退色を確認してから染色することになると思います。

GFP含有細胞での免疫蛍光染色 削除/引用 No.11579-1 - 2023/07/03 (月) 11:20:09 - ぱん いつもお世話になっております。 GFP含有細胞で免疫蛍光染色をしたいと思っています。 内在性タンパクAをAlexa488で標識したいので、もともと細胞に存在するGFPを消失させたいのですが、4%PFA固定だけではGFPは消失しないでしょうか。 何かGFPを消失させる良い方法があれば教えて頂きたいです。 どうぞよろしくお願い致します。

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